[发明专利]一种斯赤列指纹图谱的构建方法

权利要求书

1.一种斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于包括前处理、固相萃取、供试品溶液的制备及UPLC色谱测定步骤，具体为：

（1）前处理：斯赤列打成粗粉，取粗粉1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密量取甲醇，料液比为1:20~1:30，称定重量，超声提取，放置至室温，用甲醇补足减失的重量，过滤，用20.0 mL甲醇洗涤滤渣，滤液回收至干；

（2）固相萃取：将前处理得到的样品加入5.0 mL水溶解得到药材水溶液，使用Sep-Pak-C₁₈固相萃取小柱，①SPE小柱的预处理：上样前用甲醇活化SPE柱，然后用水替换滞留在柱中的甲醇，以使水溶液与柱中吸附剂表面有良好的接触，在样品加入前应保持湿润；②上样：加入药材水溶液，利用抽真空的方法使样品溶液进入SPE小柱吸附剂；③先淋洗，淋洗液为50%甲醇，除去极性大的杂质；④继续洗脱，洗脱液为100%甲醇；

（3）供试品溶液的制备：收集洗脱溶液，回收溶剂，残渣加甲醇定容至5 mL容量瓶中，以0.22 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

（4）UPLC色谱测定：将供试品溶液进行色谱测定，色谱条件为：Waters Acquity BEHC18色谱柱2.1×100 mm，1.7 μm，流速0.1~0.3 ml•min^-1，检测波长200~250 nm，柱温25~40℃，流动相乙腈A- 0.1%磷酸溶液B进行梯度洗脱，洗脱程序为：

根据分析结果，构建斯赤列指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于所述的步骤（1）中的超声提取时间为15~45min。

3.根据权利要求1所述的斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于所述的步骤（1）中的提取为用超声提取30 min。

4.根据权利要求1所述的斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于所述的步骤（1）中的料液比为1:25。

5.根据权利要求1所述的斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于所述的步骤（4）中流速为0.2 ml•min^-1。

6.根据权利要求1所述的斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于所述的步骤（4）中，检测波长为202 nm。

7.根据权利要求1所述的斯赤列指纹图谱的构建方法，其特征在于所述的步骤（4）中，柱温为35℃。