[发明专利]一种棉花隐性核不育恢复同源基因对及其敲除试剂在创造不育系中的应用有效
| 申请号： | 202110575412.8 | 申请日： | 2021-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN113278629B | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 闵玲;吴元龙;马欢欢;池华斌;张献龙 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人： | 戴嵩玮 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 棉花 隐性 不育 恢复 同源 基因 及其 试剂 创造 中的 应用 | ||
1.一种用于敲除棉花隐性核不育恢复同源基因对GhCYP703A2_A/D的sgRNA组，其特征在于，所述sgRNA组包括sgRNA1和sgRNA2；
所述sgRNA1的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；
所述sgRNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；
所述棉花隐性核不育恢复同源基因对包括以下情形中的一种DNA序列：
1)核苷酸序列如SEQ NO：1和SEQ NO：2中所示的DNA序列；和
2)编码氨基酸序列SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示蛋白质的DNA序列。
2.根据权利要求1所述sgRNA组，其特征在于，所述编码氨基酸序列SEQ ID NO：3和SEQID NO：4所示蛋白质的DNA序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。
3.一种用于基因编辑所述棉花隐性核不育恢复同源基因对GhCYP703A2_A/D的CRISPR/Cas9系统，其特征在于，包括权利要求1或2所述sgRNA组。
4.根据权利要求3所述CRISPR/Cas9系统，其特征在于，所述CRISPR/Cas9系统包括Cas9蛋白的T-DNA序列。
5.根据权利要求4所述CRISPR/Cas9系统，其特征在于，所述Cas9蛋白的T-DNA序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：9中所示。
6.权利要求1或2所述sgRNA组或权利要求3～5任意一项所述CRISPR/Cas9系统在创制棉花不育系中的应用。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述棉花不育系包括棉花细胞核雄性不育系。
8.根据权利要求6或7所述应用，其特征在于，所述棉花包括陆地棉。
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