[发明专利]一种快速的脂肪间充质干细胞成脂分化方法有效
申请号: | 202110575862.7 | 申请日: | 2021-05-26 |
公开(公告)号: | CN113215092B | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
发明(设计)人: | 陈义 | 申请(专利权)人: | 广州峰缘生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/0775 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 单香杰 |
地址: | 510700 广东省广州市黄埔*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 脂肪 间充质 干细胞 分化 方法 | ||
本发明属于干细胞技术领域,尤其涉及一种快速的脂肪间充质干细胞成脂分化方法。本发明提供的方法包括如下步骤:(1)将脂肪间充质干细胞接种于培养设备中,转染ENSG00000260823基因的沉默剂;(2)添加成脂诱导培养基,对细胞进行成脂分化诱导。通过本发明所提供的方法能够有效的促进脂肪间充质干细胞的快速成脂分化。
技术领域
本发明属于干细胞技术领域,尤其涉及一种快速的骨髓间充质成脂分化方法。
背景技术
人脂肪间充质干细胞是一种成人间充质干细胞,具有高度的自我复制和分化能力,可以分化成多种不同的细胞。在细胞组织工程中,脂肪间充质干细胞相较于其他来源的间充质干细胞具有较多的优势,如易于从脂肪组织中分离,产量高,体外培养容易膨胀等,因此,其在细胞组织工程中被广泛的应用。
脂肪间充质干细胞的成脂分化是脂肪间充质干细胞分化研究中的重要的方向,成脂分化在间充质干细胞的医学美容中具有重要的应用。因此有效的促进脂肪间充质干细胞的成脂分化对于脂肪干细胞的更好应用具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种快速的脂肪间充质干细胞成脂分化方法。
为实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:
首先,本发明提供了一种快速的脂肪间充质干细胞成脂分化方法,所述方法包括如下步骤:
(1)将脂肪间充质干细胞接种于培养设备中,转染ENSG00000260823基因的沉默剂;
(2)添加成脂诱导培养基,对细胞进行成脂分化诱导。
优选地,所述ENSG00000260823基因的转录本序列如SEQ ID NO.1所示。
优选地,所述沉默剂为siRNA,所述siRNA的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID N0.3所示。
优选地,所述成脂诱导培养基为含有10μg/mL胰岛素, 1μmoL /L地塞米松,0. 5mmoL /L异丁基甲基黄嘌呤, 200μmoL /L吲哚美辛,10% FBS的DMEM培养基。
其次,本发明提供了抑制ENSG00000260823基因表达的沉默剂在制备脂肪间充质干细胞成脂分化促进制剂中的应用。
优选地,所述沉默剂为siRNA,所述siRNA的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
其次,本发明提供了抑制ENSG00000260823基因表达的沉默剂在制备成脂分化相关基因PPARγ基因表达促进制剂中的应用。
优选地,所述沉默剂为siRNA,所述siRNA的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
最后,本发明提供了抑制ENSG00000260823基因表达的沉默剂在制备成脂分化相关基因C/EBPα基因表达促进制剂中的应用。
优选地,所述沉默剂为siRNA,所述siRNA的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
本发明的有益效果在于,本发明发现沉默ENSG00000260823基因表达的沉默剂能够有效的促进脂肪间充质干细胞成脂分化,因此可将其用于促进脂肪间充质干细胞的成脂分化。
附图说明
图1为ENSG00000260823基因siRNA的沉默效果检测结果;
图2为ENSG00000260823基因siRNA促进脂肪间充质干细胞成脂分化的检测结果;
图3 为ENSG00000260823基因siRNA促进脂分化相关基因PPARγ表达的检测结果;
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