[发明专利]一种腔肠素PBI 3939中间体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种新型腔肠素Furimazine(PBI 3939)重要中间体的制备方法，该方法包括如下步骤：以糠醛和N,N‑二甲氨基乙酸乙酯为起始原料，首先合成2‑(二甲氨基)‑3‑(呋喃‑2‑基)丙烯酸乙酯，然后，2‑(二甲氨基)‑3‑(呋喃‑2‑基)丙烯酸乙酯经过水解反应，制得3‑(呋喃‑2‑基)‑2‑氧代丙酸乙酯，最后，3‑(呋喃‑2‑基)‑2‑氧代丙酸乙酯和2‑氨基‑3‑苄基‑5‑苯基吡嗪反应制备所述中间体。本发明原料价廉易得，反应条件温和且易控制，成本较低，易实现工业化，生产能力大，所得产品纯度高，质量稳定。

技术领域

本发明涉及医药中间体技术领域，尤其是涉及一种新型腔肠素PBI 3939重要中间体及其制备方法。

背景技术

生物发光(bioluminescence)广泛存在于自然界，是指生物体内，基于生命活动的化学反应将化学能转换成光能的发光现象。生物体提取物在体外构建模型中也会有发光的现象。它不依赖于有机体对光的吸收，而是一种特殊类型的化学发光，化学能转变为光能的效率几乎为100％。不同的生物发光系统的萤光素和萤光素酶也有所不同，但是其生物发光的机理大致相同：萤光素经萤光素酶催化氧化，生成处于激发态的电子中间体，电子由激发态返回基态时释放出光子，将化学能转变成光能。

生物发光成像(Bioluminescent imaging)是一种灵敏、可靠、非侵入性的监控手段，可用于监测肿瘤的生长和转移、目标基因的表达、蛋白-蛋白之间的相互作用、药物高通量筛选和体内ATP水平等。生物发光成像具有以下几点优势：一是信噪比(SNR)高，由于生物发光系的背景信号可以忽略不计因此生物发光更加灵敏；二是萤光素底物分子毒性很小，适合各种生物活性评价；三是生物发光不需要外接光源，因此避免了自身的光漂白和光致毒风险；四是生物发光较适合于深层组织成像。综上所述，生物发光成像是一门新兴的成像技术，已经广泛应用到化学生物学、医学、分子生物学和药学等学科，并在多个领域有着不可替代的技术优势。

腔肠素(Coelenterazine)是一种萤光素，可发光，是许多萤光素酶和光蛋白酶的底物，广泛存在于水生生物体内，在生物发光体系中占有非常重要的地位。新型腔肠素Furimazine(PBI 3939)是一种咪唑并吡嗪酮类的发光底物。在哺乳动物细胞中，NanoLuc(NIuc)与Furimazine(PBI 3939)联用，能产生更亮的发光，比带Coelenterazine的Oluc-19高250万倍。

现有文献US2012117667A1中报道了新型腔肠素Furimazine(PBI 3939)的制备方法，但是该方法的原料很难获得，价格昂贵，另外还用到四氯化钛，具有很强的腐蚀性，整条路线收率很低，不适合放大生产。

现有文献Gram-scale synthesis of luciferins derived fromcoelenterazine and original insights into their bioluminescenceproperties.Organic and Biomolecular Chemistry,2019,17,15,3709–3713.同样报道了新型腔肠素Furimazine(PBI3939)的制备方法，但是该方法的合成步骤冗长，一共需要十步反应，操作麻烦，收率低，而且成本较高，仅适用于实验室合成而不适用于工业化生产。

鉴于新型腔肠素Furimazine(PBI 3939)的巨大用途及需求量的日益增加，同时目前的市场供应远远不能满足需求，因此，寻找更优的新型腔肠素Furimazine(PBI 3939)的合成路线就成为当务之急。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明申请人提供了一种新型腔肠素PBI3939重要中间体及其制备方法。本发明原料价廉易得，反应条件温和且易控制，成本较低，易实现工业化，生产能力大，所得产品纯度高，质量稳定，完全符合作为制备新型腔肠素Furimazine(PBI 3939)医药中间体的使用要求。

本发明的技术方案如下：