[发明专利]一种磁珠蛋白偶联效率的检测方法

权利要求书

1.一种磁珠蛋白偶联效率的检测方法，其特征在于，包括下述步骤：

S1、将活化后的羧基磁珠与蛋白进行偶联反应，得到偶联蛋白的羧基磁珠，然后采用含氨基活性基团的荧光染料对所述偶联蛋白的羧基磁珠表面未反应的结合位点进行荧光标记，得到待测样品；

采用含氨基活性基团的荧光染料对活化后的羧基磁珠表面的全部结合位点进行荧光标记，得到阳性对照品；所述采用含氨基活性基团的荧光染料为NH₂-PEG-FITC；

以羧基磁珠、活化后的羧基磁珠或者偶联蛋白的羧基磁珠作为空白对照品；

S2、测定待测样品、阳性对照品、空白对照品的荧光值，按下式计算羧基磁珠的蛋白偶联效率：

×100%。

2.根据权利要求1所述的磁珠蛋白偶联效率的检测方法，其特征在于，所述羧基磁珠的粒径为1-5μm。

3.根据权利要求1所述的磁珠蛋白偶联效率的检测方法，其特征在于，步骤S1中，采用羧基活化剂对羧基磁珠进行活化。

4.根据权利要求1或2所述的磁珠蛋白偶联效率的检测方法，其特征在于，步骤S1中，偶联蛋白的羧基磁珠的制备方法为：将活化后的羧基磁珠加入蛋白稀释液中，在室温下振荡孵育1-3h进行偶联反应，然后磁分离弃上清，清洗，再磁分离弃上清，即可。

5.根据权利要求1所述的磁珠蛋白偶联效率的检测方法，其特征在于，步骤S1中，荧光标记的方法为：将活化后的羧基磁珠或者偶联蛋白的羧基磁珠加入含氨基活性基团的荧光染料配制得到的荧光标记液中，在室温下振荡孵育1-3h进行荧光标记，然后磁分离弃上清，清洗，再磁分离弃上清，即可。

6.根据权利要求1所述的磁珠蛋白偶联效率的检测方法，其特征在于，步骤S2中，采用流式细胞仪测定荧光值。