[发明专利]MALDI-TOF MS检测生殖道病原体的引物组合物及用途有效
申请号: | 202110579218.7 | 申请日: | 2021-05-26 |
公开(公告)号: | CN113215322B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
发明(设计)人: | 李维;邬文燕;张雪莲;张海燕;马庆伟 | 申请(专利权)人: | 北京毅新博创生物科技有限公司;重庆市急救医疗中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/689;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/14;C12Q1/04;C12N15/11 |
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地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | maldi tof ms 检测 生殖 病原体 引物 组合 用途 | ||
1.一种用于多重PCR结合MALDI TOF-MS检测10种生殖道病原体特征片段的引物组合物,其特征在于所述引物组合物,由SEQ1-SEQ20所示的10对PCR扩增引物和SEQ21-SEQ30所示的10条延伸引物组成,所述病原体的特征片段对应的PCR扩增引物和延伸引物如下:
金黄色葡萄球的nuc片段对应的PCR扩增引物为SEQ1-SEQ2,延伸引物SEQ21,扩增片段特征峰值为6077m/z;
B族链球菌的scpB片段对应的PCR扩增引物为SEQ3-SEQ4,延伸引物SEQ22,扩增片段特征峰值为5447.6m/z;
淋病奈瑟菌的NG片段对应的PCR扩增引物为SEQ5-SEQ6,延伸引物SEQ23,扩增片段特征峰值为5288.3m/z;
阴道加德纳菌的16sRNA片段对应的PCR扩增引物为SEQ7-SEQ8,延伸引物SEQ24,扩增片段特征峰值为5919.8m/z;
白色念珠菌的ITS片段对应的PCR扩增引物为SEQ9-SEQ10,延伸引物SEQ25,扩增片段特征峰值为6363.2m/z;
生殖支原体的PA片段对应的PCR扩增引物为SEQ11-SEQ12,延伸引物SEQ26,扩增片段特征峰值为6694.4m/z;
解脲支原体的UreA片段对应的PCR扩增引物为SEQ13-SEQ14,延伸引物SEQ27,扩增片段特征峰值为5997.9m/z;
沙眼衣原体的PmpF片段对应的PCR扩增引物为SEQ15-SEQ16,延伸引物SEQ28,扩增片段特征峰值为6986.6m/z;
HPV16的L1片段对应的PCR扩增引物为SEQ17-SEQ18,延伸引物SEQ29,扩增片段特征峰值为8241.3m/z;
HPV18的L1片段对应的PCR扩增引物为SEQ19-SEQ20,延伸引物SEQ30,扩增片段特征峰值为5424.6m/z。
2.如权利要求1所述的引物组合物,其中PCR扩增引物序列为核心序列,其在5'端可包括保护碱基序列,保护碱基序列选自在5'段加入10bp的tag:ACGTTGGATG。
3.如权利要求2所述的引物组合物,其中延伸引物的5'端也可以增加作为接头的碱基序列。
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