[发明专利]旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用

说明书

本发明公开了一种旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用。该抗原蛋白质，如下(a1)或(a2)的蛋白质：(a1)氨基酸序列如SEQ ID.1所示的蛋白质；(a2)将(a1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且可与绵羊旋毛虫病血清抗体特异性结合的蛋白质。本发明旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用，首次将检测时间提前至48h，操作简便、敏感性和准确性良好；本发明建立的方法具有良好的特异性，为流行病学调查和疾病的诊断提供了一种快速的诊断方法，可同时检测感染旋毛虫成虫期、新生幼虫期、肌肉幼虫期不同时期的血清。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用。

背景技术

旋毛虫病为一种严重的全球性的人畜共患病，人或反刍动物主要通过误食了被旋毛虫感染的肉而发病，该病为二类动物疫病，每年给畜牧业造成巨大的经济损失。目前，关于旋毛虫的诊断，国际兽医局(OIE)公认的方法为压片镜检法和消化法。然而上述的两种方法在检测时存在着一定的憋端，镜检法费时费力且敏感性较低。消化法虽然在一定程度上可以提高旋毛虫的检出率，但该方法虫体检出率必须为每克肉中含有3条虫以上，才能检出，且此方法在操作时及其繁琐，需消耗大量的人力和物力。免疫学诊断，如ELISA试剂盒法、胶体金等，但从临床应用发现，这些方法检测的准确性不高、方便性不强，无法便于基层工作者操作检测。动物感染旋毛虫时，传统的诊断方法为屠宰时诊断，然而，在屠宰过程中，典型的包囊组织白色针尖大小，不易诊断；血清学诊断包括胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附试验。这些方法通常使用的是排泄分泌物做抗原，假阳性高，制备昂贵且难以进行商品化。

综上所述，现有的对旋毛虫的诊断手段，存在着检测过程繁琐，假阳性高，检测成本高的缺陷，因此，如何提高旋毛虫的免疫诊断，寻找一种可靠的抗原，建立一种高效、准确、特异性好而又简便的诊断技术是亟待解决的技术问题。

发明内容

为此，本发明提供旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明实施例提供一种蛋白质，如下(a1)或(a2)的蛋白质：

(a1)氨基酸序列如SEQ ID.1所示的蛋白质；

(a2)将(a1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且可与绵羊旋毛虫病血清抗体特异性结合的蛋白质。

编码上述所述的蛋白质的核酸分子，也属于本发明保护的范围。

本发明的一个实施例中，所述核酸分子是编码权利要求1所述的蛋白质的基因，所述基因是如下任一所述的DNA分子：

(b1)编码序列如SEQ ID NO.2所示的DNA分子；

(b2)在严格条件下与(b1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述的蛋白质的DNA分子；

(b3)与(b1)或(b2)限定的DNA分子具有90％以上同源性且编码权利要求1所述的蛋白的DNA分子。

本发明还提供所述的蛋白质在制备检测绵羊旋毛虫病的免疫层析试纸条中的应用，其中，所述试纸条包括底板、以及位于所述底板上依次固定连接样品垫、结合垫、设有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫，所述检测线靠近所述结合垫一端，所述质控线靠近所述吸水垫一端，所述检测线处包被有所述的蛋白质；

所述结合垫上包被有微球标记的小鼠IgG抗体和上述所述的蛋白质；

所述质控线处包被有山羊抗小鼠IgG抗体。

本发明的一个实施例中，所述检测抗原为在SEQ.ID.1所示的氨基酸序列的氨基末端添加6个组氨酸的蛋白。