[发明专利]一种提高直接抗人球蛋白试验灵敏度的方法

说明书

本发明公开了一种提高直接抗人球蛋白试验灵敏度的方法，包括如下步骤：标本采集后进行抗体放散，取得放散液；取放散液与患者自身红细胞悬液混合，将混合液置于孵育箱中孵育30‑60分钟；孵育完成后加入生理盐水洗涤若干次，弃去上清液；用生理盐水配制成红细胞悬液，加入到抗人球蛋白试剂卡中，离心、观察结果。本发明能够提高直接抗人球蛋白试验的灵敏度，为临床的明确诊断和后续治疗提供支持和帮助。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种提高直接抗人球蛋白试验灵敏度的方法，可以提高新生儿溶血筛查及药物性溶血或自身免疫性溶血等诊断试验的灵敏度。

背景技术

目前对于母婴血型不合导致的新生儿溶血症患者的诊断试验是新生儿溶血筛查试验，但是由于检测方法的局限性，导致新生儿直接抗人球蛋白试验常常出现假阴性的情况。常会出现放散试验阳性，而直接抗人球蛋白试验阴性的结果，导致临床诊断的不确定性。

具体而言，目前国内对直接抗人球蛋白试验的检测方法还是传统的检测致敏在红细胞表面的不完全抗体，通过抗人球蛋白(IgG,C3b/C3d)试剂卡(柱凝集法)进行检测，试剂卡由6个微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白、大分子增强剂以及0.1％叠氮钠和0.01M的EDTA(乙二胺四乙酸)。由于该方法对红细胞表面致敏的不完全抗体的量及红细胞的浓度比较敏感，因此，对于致敏的不完全抗体量少或红细胞浓度低的情形时，在检测时往往会出现假阴性的情况，从而增加临床诊断的难度，甚至导致误诊的情况发生。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种提高直接抗人球蛋白试验灵敏度的方法，以提高新生儿溶血筛查及药物性溶血或自身免疫性溶血等诊断试验的灵敏度。

为达成上述目的，本发明提供如下技术方案：一种提高直接抗人球蛋白试验灵敏度的方法，包括如下步骤：

步骤一、标本采集后进行抗体放散，取得放散液；

步骤二、取放散液与患者自身红细胞悬液混合，将混合液置于孵育箱中孵育30-60分钟；

步骤三、孵育完成后加入生理盐水洗涤若干次，弃去上清液；

步骤四、用生理盐水配制成红细胞悬液，加入到抗人球蛋白试剂卡中，离心、观察结果。

作为优选，所述步骤一的过程如下：

标本采集后，加入生理盐水洗涤若干次，最后一次吸干上清液后加入生理盐水，于恒温水浴箱中进行抗体放散，放散后离心吸取上层放散液。

作为优选，所述恒温水浴箱的温度为56℃。

作为优选，所述抗体放散的时间为8-15分钟。

作为优选，所述步骤二的混合液中放散液与患者自身红细胞悬液的体积比为2:1。

作为优选，所述步骤二中孵育温度为37℃。

作为优选，所述步骤三中的洗涤次数为三次，最后一次沥干上清液。

作为优选，所述步骤四的具体步骤为：用生理盐水配制成3％红细胞悬液，向抗人球蛋白试剂卡对应的反应腔加入10微升的3％红细胞悬液，离心并观察结果。

本发明与现有技术相对比，其有益效果在于：本发明提供的一种提高直接抗人球蛋白试验灵敏度的方法，能够提高直接抗人球蛋白试验的灵敏度，为临床的明确诊断和后续治疗提供支持和帮助。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面通过实施例对本发明作进一步具体的说明。

实施例1

本实施例包括如下步骤：