[发明专利]一种通过发酵控制提高罗伊氏乳杆菌冻干存活率的方法

权利要求书

1.一种提高罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）冻干存活率的方法，其特征在于，将罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）接种在含有丙氨酸的发酵培养基中，在渗透压为1600 mOsm/kg~2000 mOsm/kg的如下条件下培养：

（1）将罗伊氏乳杆菌种子液按4%的接种量接种至发酵培养基中培养，于37℃，恒pH 5.0高密度分批培养16 h，将发酵液在6000 rpm，4℃离心20 min，得菌体沉淀；将菌体沉淀与保护剂溶液1:1充分混合均匀后，冷冻干燥；所述保护剂为75 g/L低聚异麦芽糖和25 g/L胶原蛋白的混合溶液；所述发酵培养基成分为：酵母浸粉FM528 40 g/L、葡萄糖 110 g/L、硫酸镁 0.2 g/L、硫酸锰 0.2 g/L、Tween 80 1 mL/L、丙氨酸 5 g/L；或

（2）将罗伊氏乳杆菌种子液按4%的接种量接种至发酵培养基中培养16 h，于37℃培养至培养体系pH低于5.0时补料，使反应体系的pH为5.0；所述发酵培养基成分为：酵母浸粉FM528 35 g/L、葡萄糖 20g/L、硫酸镁 0.2 g/L、硫酸锰 0.2 g/L、Tween 80 1 mL/L、丙氨酸 5 g/L；补料液成分为葡萄糖 300 g/L，酵母浸粉FM528 100 g/L；将菌体沉淀与保护剂溶液1:1充分混合均匀后，冷冻干燥；所述保护剂为75 g/L低聚异麦芽糖和25 g/L胶原蛋白的混合溶液。

2.一种制备罗伊氏乳杆菌菌粉的方法，其特征在于，所述方法步骤如（1）或（2）：

（1）将罗伊氏乳杆菌种子液按4%的接种量接种至发酵培养基中培养，于37℃，恒pH 5.0高密度分批培养16 h，渗透压为1600 mOsm/kg-2000 mOsm/kg，将发酵液在6000 rpm，4℃离心20 min，得菌体沉淀；将菌体沉淀与保护剂溶液1:1充分混合均匀后，冷冻干燥；所述保护剂为75 g/L低聚异麦芽糖和25 g/L胶原蛋白的混合溶液；所述发酵培养基成分为：酵母浸粉FM528 40 g/L、葡萄糖 110 g/L、硫酸镁 0.2 g/L、硫酸锰 0.2 g/L、Tween 80 1 mL/L、丙氨酸 5 g/L；

（2）将罗伊氏乳杆菌种子液按4%的接种量接种至发酵培养基中培养16 h，渗透压为1600 mOsm/kg-2000 mOsm/kg，于37℃培养至培养体系pH低于5.0时补料，使反应体系的pH为5.0；所述发酵培养基成分为：酵母浸粉FM528 35 g/L、葡萄糖 20g/L、硫酸镁 0.2 g/L、硫酸锰 0.2 g/L、Tween 80 1 mL/L、丙氨酸 5 g/L；补料液成分为葡萄糖300 g/L，酵母浸粉FM528 100 g/L；将菌体沉淀与保护剂溶液1:1充分混合均匀后，冷冻干燥；所述保护剂为75 g/L低聚异麦芽糖和25 g/L胶原蛋白的混合溶液。

3.一种罗伊氏乳杆菌菌粉，其特征在于，所述罗伊氏乳杆菌菌粉由权利要求2所述的方法得到的。

4.权利要求3所述的罗伊氏乳杆菌菌粉在制备食品和保健品中的应用。

5.一种提高罗伊氏乳杆活菌数的培养基，其特征在于，所述培养基成分为：酵母浸粉FM528 40 g/L、葡萄糖 110 g/L、硫酸镁 0.2 g/L、硫酸锰 0.2 g/L、Tween 80 1 mL/L、丙氨酸 5 g/L，pH5.0；或酵母浸粉FM528 35 g/L、葡萄糖 20g/L、硫酸镁 0.2 g/L、硫酸锰0.2 g/L、Tween 80 1 mL/L、丙氨酸 5 g/L，pH5.0。

6.权利要求1所述的方法或权利要求5所述的培养基在制备罗伊氏乳杆菌菌粉和提高罗伊氏乳杆菌冻干存活率中的应用。