[发明专利]一种含有干细胞外泌体的精华液及其制备方法在审
申请号: | 202110587344.7 | 申请日: | 2021-05-27 |
公开(公告)号: | CN113304097A | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 占震锋;李庆静 | 申请(专利权)人: | 上海南滨江细胞生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K8/99 | 分类号: | A61K8/99;A61K8/98;A61K8/9789;A61K8/73;A61K8/65;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08 |
代理公司: | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人: | 刘念 |
地址: | 200000 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 含有 干细胞 外泌体 精华液 及其 制备 方法 | ||
1.一种含有干细胞外泌体的精华液,其特征在于,包括如下重量份的原料:皮肤干细胞10-13份、透明质酸钠15-20份、变性乙醇6-8份、羟乙基哌嗪乙烷磺酸2-6份、改性胶原蛋白5-8份、有机硅蜡4-6份、辛基十二醇3-5份、抗坏血酸葡糖苷2-4份、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1-3份、去离子水10-12份;
其中改性胶原蛋白由如下步骤制得:
步骤S1,向胶原蛋白中加入去离子水配制成20g/L的溶液,升温至50℃反应30-40min,经抽滤除去沉淀,得到胶原蛋白溶液;
步骤S2,向壳聚糖中加入醋酸溶液配制成20g/L的溶液,升温至50℃反应30-40min,得到壳聚糖溶液;
步骤S3,将油茶籽粉碎至40目的油茶籽粉末,向油茶籽粉末中加入石油醚,在室温下搅拌反应20-24h,静置,抽滤,取上层清液旋蒸浓缩至原体积的三分之一,得到油茶籽提取物;
步骤S4,将胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照1:4.2-4.5的质量比混合均匀,向其中加入油茶籽提取物和质量分数25%的甘油,在20℃下搅拌10min,再升温至60℃回流反应1-2h,得到改性胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体的精华液,其特征在于:步骤S3所述油茶籽粉末、石油醚的质量比为1:10。
3.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体的精华液,其特征在于:步骤S4所述油茶籽提取物的用量为胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液总质量的5-10%,甘油的用量为胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液总质量的3-5%。
4.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体的精华液的制备方法,其特征在于:包括如下制备过程:
步骤A1,向皮肤干细胞中加入电转染工作液、CTF1质粒,得到预转染物;
步骤A2,对预转染物进行电击,得到转染CTF1基因的皮肤干细胞;
步骤A3,对转染CTF1基因的皮肤干细胞进行培养,经收集、离心处理,得到干细胞分泌体;
步骤A4,将透明质酸钠、改性胶原蛋白、变性乙醇、有机硅蜡、羟乙基哌嗪乙烷磺酸搅拌均匀,制得混合物A;
步骤A5,将混合物A和辛基十二醇、抗坏血酸葡糖苷、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵、去离子水混合均匀,在70-80℃下乳化10-15min,制得混合物B;
步骤A6,将干细胞分泌体加入至混合物B中,搅拌均匀,制得含有干细胞外泌体的精华液。
5.根据权利要求4所述的一种含有干细胞外泌体的精华液的制备方法,其特征在于:步骤A1所述电转染工作液的用量为皮肤干细胞质量的8-10倍,CTF1质粒为皮肤干细胞质量的10-20%。
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