[发明专利]一种共价有机骨架封装酶的制备方法有效
| 申请号： | 202110588433.3 | 申请日： | 2021-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN113308457B | 公开（公告）日： | 2022-07-29 |
| 发明（设计）人： | 王鲁良;杨晓帅;孙舒扬;柳全文;刘玉申;刘芳洁;胡振华 | 申请（专利权）人： | 鲁东大学 |
| 主分类号： | C12N11/082 | 分类号： | C12N11/082;C12N9/08;C12N9/04 |
| 代理公司： | 烟台上禾知识产权代理事务所(普通合伙) 37234 | 代理人： | 毛毛 |
| 地址： | 264000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 共价 有机 骨架 封装 制备 方法 | ||
1.一种共价有机骨架封装酶的制备方法，其特征在于，将聚乙烯聚吡咯烷酮保护的酶溶液先与醛基配体溶液混合，再与氨基配体溶液混合，离心，所得沉淀为共价有机骨架封装酶；
所述的酶为葡萄糖氧化酶和/或辣根过氧化物酶；所述的醛基配体为1,3,5-三醛基均苯三酚，所述的氨基配体为联苯二胺；
包括如下步骤：
(1)将酶溶解于缓冲溶液中，得酶溶液；
(2)向步骤(1)获得的酶溶液中加入聚乙烯聚吡咯烷酮，搅拌均匀，得混合液A；
(3)将1,3,5-三醛基均苯三酚溶解于无水乙醇中，得溶液A；
(4)将步骤(3)获得的溶液A与步骤(2)获得的混合液A混合，搅拌0.5～2h，得混合液B；
(5)将联苯二胺溶解于无水乙醇中，得溶液B；
(6)将步骤(5)获得的溶液B与步骤(4)获得的混合液B混合，搅拌0.5～12h，得混合液C；
(7)将步骤(6)获得的混合液C离心，得沉淀，干燥后即为共价有机骨架封装酶。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)获得的混合液C中，酶的终浓度为1～500μg/mL。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)获得的混合液C中，聚乙烯聚吡咯烷酮的终浓度为1～700μg/mL。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)获得的混合液C中，1,3,5-三醛基均苯三酚的终浓度为0.1～1.0mmol/L。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)获得的混合液C中，联苯二胺的终浓度为0.3～1.5mmol/L。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(7)中，所述的离心的条件为4℃在10000rpm转速下离心5～30min。
7.一种共价有机骨架封装酶，其特征在于，使用如权利要求1～6任一项所述的制备方法获得。
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