[发明专利]基于二硫化钼/纳米铂包金三角/聚多巴胺的前列腺癌肿瘤标志物检测方法

说明书

本发明公开了基于二硫化钼/纳米铂包金三角/聚多巴胺的前列腺癌肿瘤标志物检测方法，将二硫化钼吸附在碳工作电极表面，并共价链接纳米铂包金三角，在表面电聚合形成聚多巴胺膜层，将总前列腺特异性抗原t‑PSA和游离前列腺特异性抗原f‑PSA抗体固定在修饰电极上形成敏感电极，利用结果及浓度比值实现对前列腺癌症检测。利用了二硫化钼表面积、生物相容性及结构功能性等特性，配合纳米铂包金三角具备独特催化性能，共同作用增强电极电化学性能；利用聚多巴胺膜表面大量官能团为特异性抗原提供多位点，增进电极的生物敏感性；利用抗原抗体特异性结合对t‑PSA和f‑PSA检测，并利用结果及浓度比值实现对前列腺癌高精度检测。

技术领域

本发明属于生物传感器领域，尤其涉及基于二硫化钼/纳米铂包金三角/聚多巴胺的前列腺癌肿瘤标志物检测方法。

背景技术

作为全球第五大主要死因，前列腺癌症的临床诊断主要依靠直肠指诊、血清PSA、经直肠前列腺超声和盆腔MRI检查。但由于其早期呈现出无症状的现象，导致了前列腺癌症发病率的逐年增加，同时致使影像学诊断方法存在局限。采用对血清中前列腺癌症的相关肿瘤标志物进行检测，实现对前列腺癌症进行筛查，将对前列腺癌症发病率进行有效控制。现如今国内外血清钟肿瘤标志物的检测手段常用酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光免疫分析、生物发光免疫分析、化学发光免疫分析、聚合酶链式反应(PCR)和放射免疫分析等。各类检测方法存在设备大型、耗时长、且对操作人员技术要求高的问题，通常不仅需要被检测人员前往特定场所，血液样本也需要在实验室或医院进行进一步的处理。相应的，电化学生物传感技术通过生物识别元件应对各类检测对象，并将生物信号转换为可读的电信号结果，这种特性使得它可以实现对待测物质移动快速检测，同时具备低成本、灵敏快速的特点，可以很好解决上述问题。目前已广泛应用于各类生物物质的检测。

目前，现有技术方案广泛应用电化学生物传感器于前列腺癌症检测。例如：现有研究开发电化学免疫传感器在丝网印刷电极(SPE)修饰有基于金纳米颗粒(AuNPs)和壳聚糖(CHI)纳米复合膜检测前列腺特异性抗原(PSA)。稳态电流随PSA浓度在1-18ng/mL范围内线性增加，检测限为0.001ng/mL^[1]。还有研究采用金纳米棒功能化的还原氧化石墨烯(AuNRs/rGO)来检测PSA。由于掺杂氟的氧化锡(FTO)电极的导电性增强，通过修饰具有更明显表面凹度和压痕的Au NRs，检测PSA获得了很强的初始电化学电流信号。线性范围和检出限(LOD)分别为0.01-1.0pg/mL和3.0fg/mL^[2]。如上阐述的各类现有设计，目前电化学生物传感器用于前列腺癌的检测方法主要针对的目标物质为血液中的前列腺特异性抗原(PSA)，然而研究表明在较浓度范围(PSA＜10ng/mL)，由于浓度的上升可能源于前列腺炎症等其他疾病，其对于前列腺癌症的检测精准度较低。同时，如上所述为了放大电化学信号，电极通常采用各类纳米材料修饰选择，然而现有研究存在检测下限较高的问题。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种基于二硫化钼/纳米铂包金三角/聚多巴胺的前列腺癌肿瘤标志物检测方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种基于二硫化钼/纳米铂包金三角/聚多巴胺的前列腺癌肿瘤标志物检测方法，包括以下步骤：

1)在丝网印刷双通道电极的两个碳工作电极上修饰复合金属纳米材料：

(1)二硫化钼层修饰：将二硫化钼溶液滴加在清洗过的碳工作电极表面，在60-80℃条件下加热30-60分钟；

(2)纳米铂包金三角层修饰：将金三角溶液、硝酸银、抗坏血酸和去离子水加入反应瓶中，并在65-75℃条件下水浴20-25分钟，然后加入氯铂酸溶液，并将混合溶液放置过夜，得到纳米铂包金三角溶液；将制备的纳米铂包金三角滴加在修饰二硫化钼层工作电极表面，在60-80℃条件下加热30-60分钟；