[发明专利]一种口蹄疫O型PanAsia-2谱系储备疫苗毒株及其构建方法和应用

说明书

本发明提供了一种口蹄疫O型PanAsia‑2谱系储备疫苗毒株及其构建方法和应用，属于兽药生物制品技术领域。口蹄疫重组病毒rHN/TUR09/VP1以O/HN/CHA/93病毒株为骨架，嵌合O/TUR/5/2009的VP1基因所得。rHN/TUR09/VP1不仅与遗传关系较近的口蹄疫O型PanAsia谱系和Ind‑2001谱系毒株的抗原高度匹配，而且与遗传关系较远的口蹄疫O型Cathay谱系和Mya‑98谱系毒株的抗原匹配，表明rHN/TUR09/VP1不仅能很好的免疫防控我国当前O型多谱系FMD病毒株的流行，而且可作为战略储备疫苗毒株用于我国边境地区O/Panasia‑2谱系口蹄疫的有效防控。

技术领域

本发明属于兽药生物制品技术领域，具体涉及一种口蹄疫O型PanAsia-2谱系储备疫苗毒株及其构建方法和应用。

背景技术

FMD(Foot-and-mouth disease,FMD)是口蹄疫病毒(Foot-and-mouth diseasevirus,FMDV)牛、羊和猪等主要家畜的烈性传染病。该病的爆发和流行严重危害畜群的生产力和畜产品质量，给发病地区的畜牧业及其相关产业造成巨大的经济损失。因此，该病是我国重点防控的动物疫病之一。

我国是口蹄疫流行比较严重的国家，尤其是O型口蹄疫对我国畜牧养殖业的危害最严重。国家口蹄疫参考实验室分子流行病学调查显示，除了历史存留的O型Cathay谱系毒株外，我国当前流行的O型Panasia，O型Mya-98谱系毒株以及这几年广泛引发疫情的O型Ind-2001谱系毒株均为境外流行毒株传入。而且每传入一个新毒株，都会引起新一轮疫情的暴发。如2017年新传入我国的Ind-2001谱系毒株，先在新疆引起2起疫情，2018年在湖北、安徽和贵州等多地引起9起疫情，而且该毒株仍在我国的许多省份流行和传播，对我国畜牧养殖业造成了巨大的影响。我国边境线较长，且周边国家和地区FMD疫情常年不断，尤其是近年来流行于中东，西亚等地区的O型Panasia-2系(O型Panasia的另一分支)毒株，具有较强的流行潜力，给我国口蹄疫的防控构成了新的威胁。因此，为了有效防范O/PanAsia-2病毒株传入我国的风险，必须针对性地开展相关研究，做好疫苗战略储备。

FMDV衣壳(P1基因)由4种结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4各60分子构成，它们是病毒感染和疫苗免疫诱导机体产生保护性抗体的主要免疫基因，其中VP1、VP2、VP3结构蛋白上包含许多的线性或构象性的抗原表位或抗原决定簇，它们在诱导保护性抗体的产生方面发挥着非常重要的作用。但FMDV是小RNA病毒，在免疫压力下，暴露于衣壳外部的VP1基因高度易变，常导致病毒抗原性发生改变，直接影响了型内不同谱系病毒株之间交叉免疫保护，给疫病的预防控制造成一定的阻碍。

大量的研究表明，利用FMDV反向遗传操作技术替换流行毒株的结构蛋白P1或VP1基因可以快速发展FMDV疫苗候选株。然而现有技术不恰当的基因重组会影响重组后病毒的复制能力，或者导致重组病毒无法拯救成功，给FMDV疫苗的研发带来了较大的技术难题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种口蹄疫O型PanAsia-2系储备疫苗毒株及其构建方法和应用，所述口蹄疫病毒株不仅能够同时对近些年我国流行的O型PanAsia谱系、Ind-2001谱系、Mya98谱系和Cathay谱系口蹄疫病毒株具有较好的交叉反应性，大大拓展了病毒疫苗的抗原谱，有利于提高我国当前O型口蹄疫的有效防控，而且可以作为战略储备疫苗毒株，有效防范未来随时可能传入我国的O/PanAsia-2口蹄疫的流行。

本发明提供了一种口蹄疫O型PanAsia-2系储备疫苗毒株rHN/TUR09/VP1，以口蹄疫病毒O/HN/CHA/93为骨架，嵌合了口蹄疫O型O/PanAsia-2谱系疫苗株O/TUR/5/2009的VP1基因所得。

优选的，所述口蹄疫疫苗株O/TUR/5/2009的VP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。