[发明专利]一种心肌缺血再灌注损伤标志物circRNA及其应用

说明书

本发明公开了一种心肌缺血再灌注损伤标志物circRNA及其应用，属于生物技术领域。本发明证明了circ‑Fbxl5能够在心肌细胞中与miRNA‑146a形成海绵吸附关系从而解除miRNA‑146a对心肌缺血再灌注损伤的保护作用，并设计了一种能够敲减circ‑Fbxl5表达的shRNA。经检测，本发明制备的shRNA能够敲减circ‑Fbxl5表达量，能够使心肌缺血再灌注小鼠的梗死面积显著缩小，心肌凋亡水平降低，证明本发明制备的shRNA能够作为防治心肌缺血再灌注损伤的药物加以应用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种心肌缺血再灌注损伤标志物circRNA及其应用。

背景技术

冠心病是严重危害人类健康及生命的主要疾病，全球每年约有180万患者死于该病。急性心肌梗死(心梗)作为冠心病的严重类型，是冠心病致死致残的最主要原因。及时有效的开通罪犯血管、恢复心肌水平血流灌注是挽救患者生命、提高生存质量的主要措施，即心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)治疗。然而，早在1985年，Braunwald就指出缺血再灌注其实是一把双刃剑。虽然病变血管被开通，濒死心肌被挽救，但再灌注过程中所产生的的自由基及钙超载等因素，不仅不能使组织及器官功能恢复，反而加重组织、器官的功能障碍和结构损伤，这种由再灌注所造成的的损伤即心肌缺血再灌注损伤。研究表明，心肌缺血再灌注术后30天内仍有5-6％的患者出现心血管症状，这不仅对患者产生了巨大危害，更造成了沉重的社会负担。因此，深入探讨心肌缺血再灌注损伤的发生及发展机制，并寻求有效的干预措施成为临床上亟待解决的难题。

总体而言，心肌缺血再灌注损伤机制复杂，干预靶点及措施较多，目前为止鲜有较为简便而且有效的干预措施应用于临床心肌缺血再灌注损伤的预防及治疗。于是，寻求更精准、便捷而有效的防治心肌缺血再灌注损伤的方法迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的是提供一种心肌缺血再灌注损伤标志物circRNA及其应用，以解决上述现有技术存在的问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

技术方案之一，提供了circRNA作为心肌缺血再灌注损伤干预靶点的应用，所述的circRNA为circ-Fbxl5，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的，所述的circ-Fbxl5表达上调造成心肌缺血再灌注损伤产生。

优选的，所述的circ-Fbxl5能够结合miRNA-146a从而解除miRNA-146a对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。

技术方案之二，提供了一种敲减circ-Fbxl5表达量的shRNA，所述的shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示。

技术方案之三，提供了一种包含所述的shRNA的表达载体。

优选的，所述的表达载体是AAV9载体。

技术方案之四，提供了所述的shRNA或所述的表达载体在制备防治心肌缺血再灌注损伤的药物中的应用。

技术方案之五，提供了一种防治心肌缺血灌注损伤的药物，，所述药物中包含所述的shRNA或所述的表达载体。

本发明公开了以下技术效果：

本发明证明了circ-Fbxl5能够在心肌细胞中与miRNA-146a形成海绵吸附关系从而解除miRNA-146a对心肌缺血再灌注损伤的保护作用，并设计了一种能够敲减circ-Fbxl5表达的shRNA。经检测，本发明制备的shRNA能够敲减circ-Fbxl5表达量，能够使心肌缺血再灌注小鼠的梗死面积显著缩小，心肌凋亡水平降低，证明本发明制备的shRNA能够作为防治心肌缺血再灌注损伤的药物加以应用。本发明为临床上防治心肌缺血再灌注损伤提供了新的药物，为进一步对心肌缺血再灌注损伤进行研究指明了方向。

附图说明