[发明专利]hsa_circ_0000284在制备神经母细胞瘤预后制剂中的应用

说明书

本发明公开了hsa_circ_0000284在制备神经母细胞瘤预后制剂中的应用，涉及分子生物学技术领域。本发明还公开了所述hsa_circ_0000284的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，其特异性引物核苷酸序列如SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示。对38例神经母细胞瘤患者进行生存曲线分析发现，hsa_circ_0000284高表达的患者具有较差的术后生存率(P＝0.0107)。本发明通过检测hsa_circ_0000284的表达水平，进而对神经母细胞瘤患者做出预后判断，使hsa_circ_0000284可作为神经母细胞瘤临床诊断评估的重要指标。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，更具体的说是涉及hsa_circ_0000284在制备神经母细胞瘤预后制剂中的应用。

背景技术

神经母细胞瘤(neuroblastoma，NB)是儿童最常见的颅外实体瘤，起源于胚胎神经嵴的原始神经上皮细胞，可以沿着交感神经系统的任何地方发展，以肾上腺髓质最为常见。NB患儿占儿童肿瘤患者人数的8-10％，儿童肿瘤患者死亡人数的15％左右，大约50％在诊断时就已经出现肿瘤转移。早期NB可自发消退或单纯手术切除便能取得良好预后，但晚期NB患儿尽管采取了强化治疗措施，五年生存率仍低于40％。对神经母细胞瘤患者进行预后判定，以便选择最佳治疗方案，显著提高患者生存率，成为小儿肿瘤外科领域亟待解决的重要课题。

环状RNA(circRNA)是一类特殊的RNA分子，与传统的线性RNA不同，circRNA分子呈闭合环状结构，不易被RNA外切酶降解，表达更稳定。近年的研究表明，circRNA参与很多疾病的进展，尤其是肿瘤的发生。CircRNA具有细胞表达特异性、稳定性好及表达丰富等特点，使其作为肿瘤诊断和预后的生物标志物及精准治疗靶点。

因此，如何利用环状RNA精准实现对神经母细胞瘤预后判定是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种环状RNAhsa_circ_0000284在制备神经母细胞瘤预后制剂中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

hsa_circ_0000284在制备神经母细胞瘤预后制剂中的应用，所述hsa_circ_0000284的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

优选的，所述预后制剂为试剂盒。

优选的，所述试剂盒包括hsa_circ_0000284的特异性引物，且其核苷酸序列如SEQID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

正向引物5'-TATGTTGGTGGATCCTGTTCGGCA-3’，SEQ ID NO:2；

反向引物5’-TGGTGGGTAGACCAAGACTTGTGA-3’，SEQ ID NO:3。

优选的，所述试剂盒还包括GAPDH内参引物，且其核苷酸序列如SEQ ID NO:4和SEQID NO:5所示。

GAPDH内参引物：

正向引物5’-TGCACCACCAACTGCTTAGC-3’，SEQ ID NO:4；

反向引物5’-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3’，SEQ ID NO:5。

优选的，所述试剂盒还包括从神经母细胞瘤组织中抽提总RNA所用试剂、以总RNA为模板将hsa_circ_0000284逆转录为cDNA所用试剂和将cDNA实时定量PCR所用试剂。

更优选的，所述从神经母细胞瘤组织中抽提总RNA所用试剂包括RNA稳定溶液、Trizol试剂、三氯甲烷、异丙醇和无酶水；