[发明专利]用于快速培养骨转移癌类器官的培养基、方法以及试剂盒

权利要求书

1.一种用于培养骨转移癌类器官的培养基，其特征在于，所述培养基包括培养基组分和添加剂组分，其中，所述添加剂组分中含有IL-6、BMP4、Wnt3a、Noggin、EGF、FGF2、Gastrin、SB202190、Y27632、BSA；所述培养基组分中含有基础培养基、HEPES、GlutanMAX、N-乙酰基半胱氨酸；

其中，所述IL-6的浓度为1-20ng/ml，所述BMP4的浓度为1-10ng/ml，所述Wnt3a的浓度为100-1000ng/ml，所述Noggin的浓度为20-200ng/ml，所述EGF的浓度为10-100ng/ml，所述FGF2的浓度为2-50ng/ml，所述Gastrin的浓度为1-20nM，所述SB202190的浓度为0.1-20μM，所述Y27632的浓度为1-20μM，所述BSA的浓度为1-10mg/ml，所述基础培养基为AdvancedDMEM/F12，所述HEPES的浓度为1-30mM，所述GlutanMAX的浓度为1-10mM，所述N-乙酰基半胱氨酸的浓度为0.1-10mM。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述添加剂组分进一步包括Afamin，所述Afamin的浓度为20-200ng/ml。

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述添加剂组分进一步包括庆大霉素、两性霉素。

4.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述庆大霉素的浓度为5μg/ml-50μg/ml。

5.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述两性霉素的浓度为50ng/ml-500ng/ml。

6.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基组分和所述添加剂组分的体积比为24：1。

7.权利要求1-6中任一项所述的培养基在培养骨转移癌类器官中的用途，其特征在于，所述骨转移癌类器官选自囊腺癌骨转移类器官、肾癌骨转移类器官、乳腺癌骨转移类器官、肠癌骨转移类器官、前列腺癌骨转移类器官、肺癌骨转移类器官、宫颈癌骨转移类器官。

8.一种培养骨转移癌类器官的方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）将骨转移癌样本进行消化处理，以便获取骨转移癌细胞；

（2）利用权利要求1-6中任一项所述的培养基培养所述骨转移癌细胞，以便获取骨转移癌类器官。

其中，所述骨转移癌选自囊腺癌骨转移癌、肾癌骨转移癌、乳腺癌骨转移癌、肠癌骨转移癌、前列腺癌骨转移癌、肺癌骨转移癌、宫颈癌骨转移癌。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述消化处理包括利用组织消化液对所述骨转移癌样本进行消化，其中，所述组织消化液包括胶原蛋白酶、透明质酸酶以及TrypLE；所述胶原蛋白酶浓度为5-100μg/ml；所述透明质酸酶浓度为1-50μg/ml；所述TrypLE浓度25-35%（v/v）。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述组织消化液进一步包括庆大霉素、两性霉素；所述庆大霉素的浓度为5μg/ml-50μg/ml；所述两性霉素的浓度为50ng/ml-500ng/ml。

11.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括在对所述骨转移癌样本进行消化处理之前，将所述骨转移癌样本保存至组织保存液中，

其中，所述组织保存液包括DMEM/F12、HEPES、GlutanMAX、非必需氨基酸NEAA以及BSA；所述HEPES浓度为1-30mM；所述GlutanMAX浓度为1-10mM；所述非必需氨基酸NEAA浓度为2-20mM；所述BSA浓度为1-10mg/ml。