[发明专利]引物探针组合产品、试剂盒及其在蓝氏贾第鞭毛虫检测中的应用

说明书

本发明涉及分子生物学检测领域，具体而言，涉及一种引物探针组合产品、试剂盒及其在蓝氏贾第鞭毛虫检测中的应用。本发明所提供的引物和探针能够对蓝氏贾第鞭毛虫的多种基因型进行检测，准确并且高效，其灵敏度可以达到约500拷贝/mL，且特异性高，成本低，通量高，并且操作简便，为临床诊断提供了广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及分子生物学检测领域，具体而言，涉及一种引物探针组合产品、试剂盒及其在蓝氏贾第鞭毛虫检测中的应用。

背景技术

蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)是一种多鞭毛的单细胞真核生物，分布广泛，是唯一可感染人类的贾第虫，同时可以感染包括宠物和家畜在内的其他哺乳动物，蓝氏贾第鞭毛虫感染引起的贾第虫病(Giardiasis)呈世界性分布。可通过生活用水、粪便、食品等传播，会引起肠黏膜吸收和分泌功能紊乱，出现腹痛、腹泻和吸收不良等症状，免疫功能低下者易发生严重感染甚至死亡。

蓝氏贾第鞭毛虫分离株基因结构复杂多样性决定其遗传多样性，虫株间的形态变化不大，但依据遗传分析至少可以分成7个不同的聚集体或基因型(A至G)，A型和B型具有较广泛的宿主范围，如人、家畜、猫犬和少数野生动物，其余的基因型(从C～G)源于特异性宿主，如C和D主要源于犬类；E主要源于有蹄类牲畜；F和G则分别仅以猫和大鼠为宿主。

蓝氏贾第鞭毛虫分离株较多，在致病性、毒力和其他生物学性状上表现不一，然而仅凭形态学分类很难确定虫种，基因分型可以弥补形态学分类不足，同一宿主可感染不同的基因型，而同一基因型又可感染不同宿主，如果能够在一次测试中就对蓝氏贾第鞭毛虫进行明确的分型，极大方便后续的溯源和防控，做到及时控制传染源。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测蓝氏贾第鞭毛虫快速、高效、灵敏的诊断的产品和方法。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明的第一方面涉及引物探针组合产品，包括a和/或b：

a)核苷酸序列为SEQ ID NO：1～6所示的引物以及SEQ ID NO：15～17所示的探针；

b)核苷酸序列为SEQ ID NO：7～14所示的引物以及SEQ ID NO：18～21所示的探针。

本发明的第二方面涉及含有如上所述的引物探针组合产品的试剂盒。

本发明的第三方面涉及如上所述的引物探针组合产品在制备用于蓝氏贾第鞭毛虫的诊断试剂或试剂盒中的应用。

本发明的第四方面涉及蓝氏贾第鞭毛虫的非诊断目的分型检测方法，包括：

获取待测样本中的核酸；

使用如上所述的引物探针组合产品，或如上所述的试剂盒对所述核酸进行扩增。

本发明的有益效果为：

本发明所提供的引物和探针能够对蓝氏贾第鞭毛虫的多种基因型进行检测，准确并且高效，其灵敏度可以达到约500拷贝/mL，且特异性高，成本低，通量高，并且操作简便，为临床诊断提供了广阔的应用前景。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一个实施例中检测蓝氏贾第鞭毛虫A型的扩增体系的筛选结果；

图2为本发明一个实施例中检测蓝氏贾第鞭毛虫B型的扩增体系的筛选结果；