[发明专利]一种快速鉴定中间偃麦草4St染色体的方法有效
申请号: | 202110595870.8 | 申请日: | 2021-05-29 |
公开(公告)号: | CN113265483B | 公开(公告)日: | 2022-08-23 |
发明(设计)人: | 张晓军;乔麟轶;李欣;贾举庆;郭慧娟;张树伟;常利芳;陈芳;畅志坚 | 申请(专利权)人: | 山西农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 崔自京 |
地址: | 030031 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 鉴定 中间 麦草 st 染色体 方法 | ||
1.一种快速鉴定中间偃麦草4St染色体的方法,其特征在于,包括:
提取植株基因组DNA,进行PCR扩增;
若扩增得到下列任一目标片段,则具有中间偃麦草4St染色体基因;
所述目标片段包括如SEQ ID NO .1~SEQ ID NO .6所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的一种快速鉴定中间偃麦草4St染色体的方法,其特征在于,所述PCR的扩增引物对包括如SEQ ID NO .7和SEQ ID NO .8所示的引物序列,或如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO .10所示的引物序列,或如SEQ ID NO .11和SEQ ID NO .12所示的引物序列,或如SEQ ID NO .13和SEQ ID NO .14所示的引物序列,或如SEQ ID NO .15和SEQ IDNO .16所示的引物序列,或如SEQ ID NO .17和SEQ ID NO .18所示的引物序列中的一对或多对。
3.根据权利要求1所述的一种快速鉴定中间偃麦草4St染色体的方法,其特征在于,所述PCR的扩增体系:2×Taq PCR Mix预混液5 μL,50 ng/μL的上游引物1 μL,50 ng/μL的下游引物1 μL,50~100 ng/μL的模板DNA为1.5 μL,1.5 μL无菌去离子水,反应体系总体积为10 μL。
4.根据权利要求1所述的一种快速鉴定中间偃麦草4St染色体的方法,其特征在于,所述PCR的扩增程序:94℃预变性5分钟;94℃变性30秒,58℃退火45秒,72℃延伸30秒,运行35个循环;最后72℃延伸10分钟,PCR扩增产物在4℃保存。
5.一种快速鉴定中间偃麦草4St染色体的试剂盒,其特征在于,包括权利要求2所述的扩增引物对。
6.权利要求1~4任一所述方法或权利要求5所述的试剂盒在小麦遗传育种中的应用,其特征在于,用于快速鉴定中间偃麦草4St染色体。
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