[发明专利]一株可降解亚硝酸盐的异常威克汉姆酵母菌

说明书

本发明属于生物工程技术领域，提供了一株可降解亚硝酸盐的异常威克汉姆酵母菌，所述菌株经过18SrDNA菌株鉴定测序序列分析结果确定为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)，该菌株已于2021年1月保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为：CCTCC M 2021030，经检测该菌剂投放用于水产养殖池塘中，可以稳定降解亚硝酸盐和铵态氮，又不会对水体有益微生物以及鱼虾蟹等养殖生物产生毒害，能够改善水产养殖池塘的水质；还可以用于其他方面亚硝酸盐的去除工作。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，提供了一株可降解亚硝酸盐的异常威克汉姆酵母菌及其应用。

背景技术

亚硝酸盐的积累是造成养殖水体污染的主要原因之一，是诱发水产动物爆发性疾病的重要环境因素。在水产养殖中，除了养殖动物外，还有大量的浮游植物和藻类，仅以这些植物为食远远不能满足高密度水产养殖动物的需求，因此，需要人工饵料来满足养殖动物的营养需求。然而,为了追求高收益在短时间内,许多养殖企业和农民增加太多的人工鱼饵,结合繁殖动物的排泄物和分泌物的积累,导致养殖水体的严重污染,最重要的氮污染物是氨和亚硝酸盐。亚硝酸盐是将氨转化为硝酸盐的中间体。一旦硝化过程被阻止，亚硝酸盐就会在水生生态系统中迅速积累。铵态氮和亚硝酸盐含量过高，严重影响了水生生物的生存和生长，给养殖造成了巨大的经济损失。

在水产养殖中，生物脱氮菌主要是硝化反硝化菌和厌氧氨氧化菌。除上述细菌菌株外，酵母作为一种优良的环境污染物降解菌，已被国内外学者研究。它不仅在葡萄酒工业中发挥着重要的作用，而且在各种污水的处理、废物的利用和污染土壤的修复中得到了更广泛的应用。然而，从现有专利和文献来看，酵母作为一种亚硝酸盐去除菌株的详细报道很少。

因此找寻可降解亚硝酸盐的酵母菌株成为本领域技术人员研究的主要方向。

发明内容

本发明针对上述技术存在的不足，提供了一株可降解亚硝酸盐的异常威克汉姆酵母菌，所述菌株经过18SrDNA菌株鉴定测序序列分析结果确定为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)，该菌株已于2020年12月保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为：CCTCC M 2021030，经检测该菌株制备的菌剂投放用于水产养殖池塘中，可以稳定降解亚硝酸盐和铵态氮，又不会对水体有益微生物以及鱼虾蟹等养殖生物产生毒害，能够改善水产养殖池塘的水质；还可以用于其他方面亚硝酸盐的去除工作。

本发明的具体技术方案是：

本发明所获得的菌株具体来源为山东省日照市万平风景区的海水样中筛选获得的，暂命名为WP-1，发明人于2021年1月7日提交至中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏编号为：CCTCC M2021030；

发明人进一步采用生理特性试验和18S rDNA分子鉴定方法对WP-1菌株进行综合鉴定，其中18S rDNA分子鉴定方法程序为：热曲线包括:95℃变性5min，然后是30个循环，包括95℃变性30min,55℃退火30min,72℃延伸1min；最后在72℃延长10分钟。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测后送测序公司(中国山东华大基因)，其18S rDNA核苷酸序列如Seq ID No：1所示；将获得的序列与GenBank数据库中可用的序列进行查询，发现WP-1与GenBank数据库中异常威克汉姆酵母的18S rDNA序列有99％-100％的同源性，结果确定上述WP-1菌株类别为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)；

经过实验，发明人发现上述异常威克汉姆酵母(WP-1)的最适生长条件为：温度30℃，碳源选择为葡萄糖，碳氮源的添加比列为20：1，pH＝6时异常威克汉姆酵母(WP-1)的生长速度最快；