[发明专利]一种利用L-精氨酸提高公猪精液常温保存效果的方法

说明书

本发明公开了一种利用L‑精氨酸提高公猪精液常温保存效果的方法，本发明利用含有L‑精氨酸的稀释液对猪精液在常温状态进行保存，提高了猪精液保存品质，延长了精液的保存时间，保存的猪精子活力高、质量好，从而有利于提高优良种公猪利用率，并获得高受胎率；同时所述稀释液制作方法简单、使用方便，便于大规模推广应用。

技术领域

本发明涉及猪繁殖技术领域，特别涉及一种公猪精液常温保存稀释液配方。

背景技术

传统的猪生产中，猪的繁殖主要采用自然繁殖技术，但其生产效率低下，母猪受精率低，种公猪的利用率低、生产成本高。采用人工授精技术可以显著提高良种公猪的利用率、克服公母猪体格大小的差异、充分利用杂种优势、阻断繁殖过程中疾病的传播，节约生产成本、提高经济效益，便于进行集约化、规模化、专业化的养猪生产。在人工受精中需要首先采集精液，新鲜精液经采集后，受到温度变化、能量消耗、保存时间延长等因素影响，精子活率会明显降低。随着猪的人工授精给规模化企业带来的效益不断增加，猪精液的保存越来越受到重视。

精液的保存分为常温保存(17℃)、低温保存(4℃)和冷冻保存(-196℃)。由于猪精子结构的特性，即猪精子中胆固醇/磷脂的比例低、不饱和脂肪酸的比例高，使得猪精子对低温冷打击与活性氧自由基非常敏感，因此在猪精液的保存过程中，通常采用常温保存方法。尽管“猪常温精液”(GB23238-2009)可以在活力60％的情况下保存超过72小时的时间，但对于猪集约化、规模化、专业化生产而言，该活力水平仍无法满足目前实际生产的需要。同时延长猪精液的保存时间也有助于进一步推广猪人工受精技术，但随着保存时间的延长，猪精子产生的活性氧自由基会逐渐增多，而过量的活性氧自由基会损伤精子，导致精子活率等降低，影响保存品质。

在精液保存过程中，通常由稀释液的组成成分、渗透压、pH值及精液的稀释倍数、保存温度共同决定精液的保存效果。稀释液主要成分包括能量物质、抗氧化剂、缓冲液、抗菌剂等。目前国内外研制的稀释液配方主要有以下几种：柠檬酸钠-糖类、Tris-柠檬酸-糖类和EDTA二钠-柠檬酸钠-糖类。不同配方的稀释液在具体成分组成上存在差异，对精子的保护效果也不相同。

精氨酸是一种碱性氨基酸，是精子蛋白的主要成分，也是一种抗氧化物质及合成肌酸的前体物质。精氨酸分为L-精氨酸、D-精氨酸和DL-精氨酸。有报道在猪精液低温保存稀释液配方中添加L-精氨酸，但当保存至一周时，精子活力仅有43.64％(许春荣等.L－精氨酸对猪精液低温保存效果的影响.西北农业学报.2014，,23(11):12-16.)，精子活力大幅降低，不利于扩大良种公畜站人工授精的辐射范围及提高优良种公猪的利用率，从而无法满足猪生产实际需要。

商品化稀释液Modena相比于其他稀释液一定程度上延长了精液的保存时间，但Modena稀释液中缺乏抗氧化物质，对于精液保存过程中精子产生的活性氧自由基不能很好的清除，不利于精液的保存。此外，在保存过程中，精子会不断地消耗能量，当能量供应不足时，精子会迅速死亡。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用L-精氨酸提高公猪精液常温保存效果的方法，通过使用含有L-精氨酸的稀释液对猪精液起到良好的常温保存效果。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案。

一种猪精液常温保存稀释液，该常温保存稀释液的成分包括25.0～30.0g/L的葡萄糖、2.0～2.7g/L的EDTA二钠、6.5～7.5g/L的柠檬酸钠、2.5～3.5g/L的柠檬酸、0.5～1.5g/L的碳酸氢钠、5.0～6.0g/L的Tris、50～150万IU/L的青霉素、50～150万IU/L的链霉素、20～60万IU/L的多黏菌素和2.5～5.0mmol/L的L-精氨酸。

优选的，所述常温保存稀释液的pH为6.9～7.3。