[发明专利]一种羧基二羟鬼笔毒肽时间分辨荧光免疫检测卡、制备及检测方法与应用

权利要求书

1.一种羧基二羟鬼笔毒肽时间分辨荧光免疫检测卡，其特征在于，包括底板和放置在所述底板上的样品垫、含有铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体的释放垫、含有羧基二羟鬼笔毒肽检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜和吸水垫。

2.根据权利要求1所述的检测卡，其特征在于：所述抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体为抗羧基二羟鬼笔毒肽单克隆抗体。

3.根据权利要求2所述的检测卡，其特征在于：

所述含有铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体的释放垫为将铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体溶液喷于释放垫上形成的；

所述铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体溶液的浓度为0.1mg/mL。

4.根据权利要求3所述的检测卡，其特征在于：

所述铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体溶液中，所述抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体和铕微球的质量比为1：25；

和/或，所述铕微球为200nm羧基化铕微球。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测卡，其特征在于：

所述羧基二羟鬼笔毒肽检测线T由羧基二羟鬼笔毒肽抗原或其溶液形成；

和/或，所述质控线C由IgG抗体或IgG抗体溶液形成；

和/或，所述含有羧基二羟鬼笔毒肽检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜为将羧基二羟鬼笔毒肽抗原溶液包被在硝酸纤维素膜形成检测线T，且将IgG抗体溶液包被在硝酸纤维素膜形成质控线C，得到含有羧基二羟鬼笔毒肽检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜；

优选，所述羧基二羟鬼笔毒肽抗原溶液的包被浓度为0.4mg/mL；

和/或，所述IgG抗体溶液的包被浓度为1.0mg/mL。

6.一种制备权利要求1-5中任一项所述的检测卡的方法，其特征在于：包括如下步骤：先制备含有铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体的释放垫和含有羧基二羟鬼笔毒肽检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜；再将样品垫、所述含有铕微球标记的抗羧基二羟鬼笔毒肽抗体的释放垫、所述含有羧基二羟鬼笔毒肽检测线T以及质控线C的硝酸纤维素膜和吸水垫组装到底板上，得到检测卡。

7.权利要求1-5中任一项所述检测卡在以下方面的应用：

(1)在制备定量或定性检测或辅助检测羧基二羟鬼笔毒肽产品中的应用；

(2)在定量或定性检测或辅助检测羧基二羟鬼笔毒肽中的应用。

8.一种检测或辅助检测待测样品中是否含有羧基二羟鬼笔毒肽的方法，其特征在于：包括如下步骤：将待测样品加入权利要求1-5中任一项所述的检测卡的样品垫上，反应，再用荧光免疫定量分析仪检测反应的产物；

若所述检测卡的检测线T荧光信号值小于等于质控线C荧光信号值，则待测样本中含有或候选含有羧基二羟鬼笔毒肽；

若所述检测卡的检测线T荧光信号值大于质控线C荧光信号值，则待测样本中不含有或候选不含有羧基二羟鬼笔毒肽。

9.一种检测或辅助检测待测样品中羧基二羟鬼笔毒肽含量的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)制备标准曲线：取与待测样品同样来源且羧基二羟鬼笔毒肽含量小于0.1μg/L的样本；

再向所述样本中加入不同浓度的羧基二羟鬼笔毒肽，得到不同浓度的标准品溶液；

再将所述不同浓度的标准品溶液加入权利要求1-5中任一项所述的检测卡的样品垫上，反应，再用荧光免疫定量分析仪检测反应的产物，得到不同浓度的标准品溶液的检测线T荧光信号值与质控线C荧光信号值；

以添加的羧基二羟鬼笔毒肽不同浓度为X轴，不同浓度对应的检测线T荧光信号值与质控线C荧光信号值的比值为Y轴，绘制标准曲线；

(2)将所述待测样本加入权利要求1-5中任一项所述的检测卡的样品垫上，反应，再用荧光免疫定量分析仪检测反应的产物，得到待测样本的检测线T荧光信号值与质控线C荧光信号值；

将所述待测样本的检测线T荧光信号值与质控线C荧光信号值代入步骤(1)得到的标准曲线中，得到待测样本中羧基二羟鬼笔毒肽的含量。

10.根据权利要求7所述的应用或权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述待测样本为尿液、血浆或血清样本。