[发明专利]一种斑马鱼幼鱼固定装置及其固定方法

说明书

本发明公开了一种斑马鱼幼鱼固定装置及其固定方法，属于生物实验技术领域。包括孔板本体，孔板本体上设有凹槽，凹槽内均固设有用于固定斑马鱼的固定槽，凹槽的上表面高于固定槽的上表面，孔板本体和固定槽均为透明材质。本发明的固定方法为，在固定槽中加入鱼麻醉剂和黏着剂，用吸管吸取出生3～5天的斑马鱼幼鱼，蛋白酶去卵膜，预麻醉后放入固定槽中，用尖头镊将斑马鱼幼鱼拨至两眼重合的侧卧位。本发明的固定装置可快速整体移动样品进行观测，实现高通量快速检测，兼容性好，还可用于宽场成像，能将斑马鱼幼鱼摆放的方向一致，在观察时便于寻找斑马鱼，夹持的精准度高，不会损伤幼鱼鱼体，检测准确，适用于固定所有出生3～5天的斑马鱼幼鱼。

技术领域

本发明属于生物实验技术领域，涉及一种斑马鱼幼鱼固定装置，还涉及一种斑马鱼幼鱼固定方法。

背景技术

斑马鱼作为一种小型脊椎类模式生物，基因与人类基因组的同源性高达87％，具有独特的生物特点和遗传学优势，并且具有饲养简单、繁殖周期短、胚胎透明、产卵量大且易收集等优点，在许多领域都得到了广泛的应用。

由于斑马鱼幼鱼整体透明，许多研究直接利用斑马鱼幼鱼进行活体观察。在实验过程中，实验人员一般采用麻醉剂将斑马鱼幼鱼麻醉，然后用吸管将其转移至甲基纤维素溶液中，再用针或镊子将斑马鱼幼鱼体位摆至两眼重合，最后进行观察拍摄。以上方法固定斑马鱼幼鱼的缺点是：1、由于斑马鱼幼鱼体型较小，一般只有2-3mm左右，且斑马鱼幼鱼游动速度较快，即使在阻力较大的甲基纤维素中也会游动，进而导致鱼体位置需要反复摆放，在此过程中不仅增大了实验人员的工作量，也可能造成幼鱼鱼体损伤，难以判别畸形结构是否为化合物导致，影响结果准确性；2、每组实验斑马鱼幼鱼数量较大，在实验过程中固定鱼体耗时耗力。

因此，亟需设计一种简单快速的斑马鱼幼鱼固定装置及其固定方法，提高实验效率，保证实验准确性。

发明内容

为解决现有技术中存在的以上不足，本发明旨在提供一种斑马鱼幼鱼固定装置，以达到可快速整体移动样品进行观测，高通量快速检测的目的；

本发明还要提供一种斑马鱼幼鱼固定方法，以达到固定过程中不会损伤幼鱼、提高检测准确性、快速固定斑马鱼幼鱼的目的。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：一种斑马鱼幼鱼固定装置，包括孔板本体，所述孔板本体上设有多个凹槽，每个凹槽内均固设有用于固定斑马鱼的固定槽，所述凹槽的上表面高于固定槽的上表面，所述孔板本体和固定槽均为透明材质。

作为对本发明的限定：所述凹槽设有八组，每组十二个，所述凹槽为圆柱形，其直径为6.5～7.0mm，深度为5.5mm，横向孔距和纵向孔距均为8.9～9.1mm。

作为对本发明的进一步限定：所述固定槽的两端为半圆形，且与凹槽的内壁相切，所述固定槽的两个侧板相互平行，所述固定槽的宽度为6.3～6.7mm，深度为4.8～5.2mm，所述固定槽底板的厚度为0.45～0.55mm。

作为对本发明的另一种限定：所述孔板本体的材质为透明亚克力或透明硅胶。

一种斑马鱼幼鱼固定方法，固定斑马鱼幼鱼时，按照以下方法顺序进行：

步骤一：选择出生3～5天的斑马鱼幼鱼，加入蛋白酶，去除未孵化出膜的斑马鱼幼鱼的卵膜；

步骤二：用吸管吸取斑马鱼幼鱼，并排出吸管内多余的水分，在吸管中放入鱼麻醉剂，预麻醉10～20s；

步骤三：取权利要求1～4所述的斑马鱼幼鱼固定装置，在固定槽中加入鱼麻醉剂和黏着剂，然后放入预麻醉后的斑马鱼幼鱼；

步骤四：用尖头镊将斑马鱼幼鱼拨至两眼重合的侧卧位，待黏着剂凝固即可进行后续观察。