[发明专利]与高温、干旱双重胁迫相关的玉米ZmDnajA6基因及其载体和应用有效
申请号: | 202110609156.X | 申请日: | 2021-06-01 |
公开(公告)号: | CN113337518B | 公开(公告)日: | 2023-02-17 |
发明(设计)人: | 鲁晓民;曹丽茹;张凯;王国瑞;王振华;张新;张前进;魏昕;魏良明;郭书磊 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院粮食作物研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
代理公司: | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人: | 冉珊敏 |
地址: | 450003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高温 干旱 双重 胁迫 相关 玉米 zmdnaja6 基因 及其 载体 应用 | ||
1.与高温、干旱双重胁迫相关的玉米基因,其特征在于:所述玉米基因为ZmDnajA6,其启动子序列中包括非生物胁迫响应元件、植物生长发育的元件和响应激素的元件;
所述非生物胁迫响应元件包括LTR,MBS,Sp1,ARE和G-box;植物生长发育的元件包括O2-site和CAT-box;响应激素的元件包括ABRE,CGTCA-motif,GARE-motif;
所述ZmDnajA6基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,该基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.含有权利要求 1所述的玉米基因的载体。
3.根据权利要求2所述的载体,其特征在于:所述载体为融合表达载体。
4.根据权利要求3所述的载体,其特征在于,所述融合表达载体的制备步骤如下:
(1)以玉米总RNA反转录得到的cDNA为模板,以ZmDnajA6-F和ZmDnajA6-R为引物对进行扩增目的片段并回收;
(2)以步骤(1)的目的片段作为模板,分别以ZmDnajA6-F-AscI和ZmDnajA6-R-BamHI,作为特异性引物对,进行扩增;
(3)步骤(2)的扩增产物经双酶切后用T4连接酶过夜连接并转化,挑取验证正确的阳性克隆即为玉米ZmDnajA6基因的融合表达载体ZmDnajA6- pFGC5941;
所述步骤(1)中引物ZmDnajA6-F序列如SEQ ID No.3所示,引物ZmDnajA6-R序列如SEQID No.4所示;
所述步骤(2)中引物ZmDnajA6-F-AscI序列如SEQ ID No.5所示,引物ZmDnajA6-R-BamHI序列如SEQ ID No.6所示。
5.权利要求1所述的基因在培育耐高温、干旱双重胁迫的玉米植株中的应用。
6.权利要求2-4任一项所述的载体在培育耐高温、干旱双重胁迫的玉米植株中的应用。
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