[发明专利]一种半定量检测金刚烷胺的试纸条及其制备方法和应用在审
申请号: | 202110611354.X | 申请日: | 2021-06-01 |
公开(公告)号: | CN113552361A | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | 邱静;宁香雪;贾琪;钱永忠 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/52 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 黄燕 |
地址: | 100000 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 定量 检测 金刚烷胺 试纸 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种半定量检测金刚烷胺的试纸条,其特征在于,所述试纸条包括底板,在所述底板的表面沿层析方向依次铺设有样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,且所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次固定连接,所述硝酸纤维素膜上包被有四条检测线和质控线,四条所述检测线是指包被有四个浓度梯度的金刚烷胺抗原的检测线,所述质控线是指包被有X抗鼠IgG的质控线,所述X为羊或兔;所述胶体金结合垫上设有金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物;
四条所述检测线沿所述层析方向金刚烷胺抗原的浓度依次递增,所述金刚烷胺抗原指金刚烷胺-牛血清白蛋白的偶联物。
2.根据权利要求1所述的半定量检测金刚烷胺的试纸条,其特征在于,沿所述层析方向,所述硝酸纤维膜上所述金刚烷胺抗原的浓度依次为0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL。
3.一种如权利要求1或2所述的半定量检测金刚烷胺的试纸条的制备方法,其特征在于,其包括如下步骤:
在所述底板上,将样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫进行拼接,所述酸纤维素膜上包被有四条所述检测线和所述质控线。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括在所述硝酸纤维素膜上间隔包被0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL浓度的金刚烷胺抗原作为四条检测线,并在所述硝酸纤维素膜上包被X抗鼠IgG作为质控线,且所述质控线与四条所述检测线间隔设置;
优选地,所述X抗鼠IgG的浓度为0.3-0.8mg/mL。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,在所述硝酸纤维膜上,每0.5-2cm长度上喷1-2μL的金刚烷胺抗原或X抗鼠IgG,相邻两条线之间的间距为0.2-0.5cm;
所述制备方法还包括在所述硝酸纤维膜上喷设金刚烷胺抗原或X抗鼠IgG后进行干燥。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,在将所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫进行拼接之前还包括制备金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物,并将所述金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物喷于结合垫上制得所述胶体金结合垫;
所述金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物的制备包括:将胶体金溶液、硼酸钾溶液、金刚烷胺抗体溶液和牛血清白蛋白溶液混合制得混合液,离心后的沉淀用磷酸缓冲液PB复溶制得金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物;
每1mL胶体金溶液中添加2-4μL的金刚烷胺抗体溶液,添加0.1M的硼酸钾溶液40-50μL,添加40-45μL的1wt%BSA溶液;
优选地,离心后的沉淀用磷酸缓冲液PB和5-10wt%的蔗糖复溶;
优选地,每1-2cm的结合垫上喷2-5μL的所述金刚烷胺抗体和胶体金的偶联物。
7.一种检测金刚烷胺的试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1-2任一项所述的半定量检测金刚烷胺的试纸条以及壳体。
8.一种使用权利要求1-2任一项所述的半定量检测金刚烷胺的试纸条或权利要求7所述的检测金刚烷胺的试剂盒进行半定量检测金刚烷胺的方法,其特征在于,包括如下步骤:
将所述试纸条插入所述待检物质中或将所述待检物质滴在所述试纸条的样品垫上,根据条带判断检测结果。
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