[发明专利]人类口腔放线菌来源的防御素、及其编码基因和用途

权利要求书

1.一种人类口腔放线菌来源的防御素或其生物活性功能片段、变体或衍生物，所述防御素具有如SEQ ID NO:1-4之一所示的氨基酸序列；

优选地，所述防御素的氨基酸序列为：

SEQ ID NO:1GFGCPWNAYECDRHCVSKGYTGGNCRGKIRQTCHCY(AMSIN)；

SEQ ID NO:2CFACPFNEHQCHNHCLSKGYRGGFCGGFAAATCRCH(AMSIN-1)；

SEQ ID NO:3DLSCPWAPSVCNRHCLSHGYRGGYCAGPIKLVCHCY(AMSIN-2)；或

SEQ ID NO:4YNCPTDESPCDRHCRYSGYRGGYCGGILKTSCRCY(AMSIN-3)。

2.编码如权利要求1所述的防御素的核酸序列，其具有如SEQ ID NO:5-8之一所示的核酸序列；

优选地，编码所述防御素的核酸序列为：

SEQ ID NO:5

GGCTTCGGCTGCCCCTGGAACGCCTACGAGTGCGACCGCCATTGCGTCAGCAAGGGATACACCGGTGGAAACTGCCGCGGCAAGATCCGCCAGACCTGCCACTGCTAC(AMSIN)；

SEQ ID NO:6

TGCTTCGCCTGCCCTTTCAACGAACATCAGTGCCACAACCACTGCTTGAGCAAAGGATATCGCGGAGGGTTCTGCGGAGGATTCGCTGCCGCCACCTGCCGCTGCCAC(AMSIN-1)；

SEQ ID NO:7

GACCTTAGCTGCCCCTGGGCCCCATCCGTATGTAACCGCCACTGCCTTAGTCACGGTTACAGGGGAGGCTATTGCGCCGGCCCCATCAAGCTCGTGTGTCACTGCTAC(AMSIN-2)；或

SEQ ID NO:8

TACAACTGCCCTACTGACGAGTCTCCGTGCGACCGTCACTGCAGGTACTCCGGATACCGGGGCGGCTACTGCGGAGGAATACTCAAGACCTCCTGCCGCTGTTAC(AMSIN-3)。

3.一种制备如权利要求2所述的核酸序列的引物，其包括正向引物和反向引物；其中，所述正向引物的序列如SEQ ID NO:9所示，并且所述反向引物的序列如SEQ ID NO:10所示。

4.一种如权利要求1所述的防御素的制备方法，所述方法包括以下步骤：

合成所述防御素的直线肽，再利用反相高效液相色谱法进行分离纯化；

优选地，所述方法还包括在利用反相高效液相色谱法进行分离纯化之前将合成的防御素的直线肽复性的步骤；

优选地，所述复性包括将合成的防御素的直线肽溶于水中，然后加入二甲基亚砜至终浓度5-20％(体积比)，混匀后加入磷酸盐缓冲液并温育过夜。

5.一种抑制或杀灭细菌药物组合物，其包含如权利要求1所述的防御素和药学上可接受的稀释剂、赋形剂和/或载体。

6.如权利要求1所述的防御素或如权利要求5所述的药物组合物在制备用于抑制或杀灭细菌、或治疗细菌引发的系统性感染的药物中的应用，

优选地，所述细菌为革兰氏阳性菌；更优选地，所述革兰氏阳性菌选自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)及其链霉素抗性株；变形链球菌(Streptococcus mutans)；唾液链球菌(Streptococcus salivarius)；血链球菌(Streptococcus sanguinis)；链霉菌属，包括灰色链霉菌和阿氟曼链霉菌；梭形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusfusiformis)；葡萄球菌属(Staphylococcus)菌株，包括耐青霉素和耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌；和屎肠球菌(Enterococcus faecium)。

7.如权利要求1所述的防御素或如权利要求5所述的药物组合物在制备广谱抗菌的药物中的应用。