[发明专利]用于检测伏马毒素B1的试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及用于检测伏马毒素B1的试剂盒及检测方法。该试剂盒包括由伏马毒素B1包被的磁珠、包被羊抗鼠IgG的纳米金探针及伏马毒素B1的单克隆抗体；磁珠和纳米金探针可通过单克隆抗体特异性结合，其中，单克隆抗体的可变区用于结合磁珠上的伏马毒素B1，单克隆抗体的恒定区用于结合纳米金探针上的羊抗鼠IgG的可变区。由于纳米金探针上的羊抗鼠IgG是通过可变区与单克隆抗体的恒定区进行结合的，这种结合更加牢固，具有稳定的放大作用，适合于获得准确和灵敏度高的检测结果。

技术领域

本发明涉及伏马毒素B1检测技术领域，尤其涉及用于检测伏马毒素B1的试剂盒及检测方法。

背景技术

伏马毒素(Fumonisins，FBs)又称为烟曲霉毒素，主要由串珠镰刀菌产生。FBs分为A、B、C、D四大类，目前已发现的有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4和FP1，共11种。其中FB1为其主要组分，含量占伏马菌素的70％-80％，且毒性最强，是导致伏马菌素毒性作用的主要成分。FB1具有多种毒性，主要包括神经毒性、组织器官毒性、致癌性、免疫毒性、细胞毒性、生殖毒性等。伏马菌素与马脑白质软化症、猪肺水肿症、羊肝肾病变和人类的食道癌等人畜疾病密切相关。

目前FB1的检测方法有高效液相色谱法、高效液相色谱-固相荧光法、免疫亲和柱净化-柱后衍生高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱联用法、免疫学检测方法等。其中高效液相色谱法在伏马毒素的检测中最为常用。但该方法前处理过程繁琐，操作复杂，需要大型仪器设备及专业操作人员，不便于实际检测中的样品筛查。免疫学检测方法相对简单，尤其是IC-ELISA方法在小分子物质的免疫学检测中应用最为广泛，其具有相对于高效液相色谱法简单、灵敏、高效的优点，适合大量样品的初筛。但是对于一些微量样品甚至是痕量样品，其检测手段越来越受限，不能满足实际需求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在提供一种用于检测伏马毒素B1的试剂盒，至少一定程度上解决上述技术问题之一。

第一方面，本发明实施例提供一种用于检测伏马毒素B1的试剂盒，包括由伏马毒素B1包被的磁珠、包被羊抗鼠IgG的纳米金探针及伏马毒素B1的单克隆抗体；所述磁珠和所述纳米金探针可通过所述单克隆抗体特异性结合，其中，所述单克隆抗体的可变区用于结合所述磁珠上的伏马毒素B1，所述单克隆抗体的恒定区用于结合所述纳米金探针上的羊抗鼠IgG的可变区。

在本发明的具体实施方式中，所述磁珠上的伏马毒素B1是通过载体蛋白进行包被的。

在本发明的具体实施方式中，所述载体蛋白包括白念珠菌酰基载体蛋白1、破伤风类毒素、破伤风类毒素己二酸酞阱衍生物、重组铜绿假单胞菌外毒素A、重组铜绿假单胞菌外毒素A己二酸酞脐衍生物、可溶内源性短肽及其修饰物中的至少一种。

在本发明的具体实施方式中，所述伏马毒素B1是先与所述载体蛋白结合后，再包被于所述磁珠上的。

在本发明的具体实施方式中，所述纳米金探针的合成步骤是以四氯金酸作为前驱体，维生素C为还原剂，阿拉伯胶为诱导剂进行的。

在本发明的具体实施方式中，所述纳米金探针表面具有表面增强拉曼散射热点。

在本发明的具体实施方式中，所述试剂盒还包括磁珠悬浮液、底物液和终止液。

第二方面，本发明实施例还提供第一方面涉及的试剂盒用于检测玉米中伏马毒素B1的方法，包括制备玉米样品的步骤以及对所述玉米样品进行分析的步骤。

在本发明的具体实施方式中，所述制备玉米样品的步骤包括，将研磨的玉米粉使用甲醇水溶液进行萃取，以及对于萃取后的上清液进行过滤的步骤。

与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：