[发明专利]钴离子配位型硼量子点基于酶催化反应的乳酸荧光纳米生物探针的制备方法

权利要求书

1.一种钴离子配位型硼量子点基于酶催化反应的乳酸荧光纳米生物探针的制备方法，其特征在于，该制备方法具体包括以下步骤：

（1）量取25~50毫升丙酮，加入50~100毫克硼粉末，在搅拌下向其中逐滴加入新鲜配制的浓度为0.1~1.0摩尔/升的六水合硝酸钴水溶液1~5毫升，充分搅拌后形成均质的混合液-A；

（2）将混合液-A置于超声波细胞粉碎仪中，采用超声处理1~5分钟，接着冷却10~20分钟，执行超声处理和冷却的重复操作5~10次，制备出钴离子配位硼纳米片Co@BNSs分散液；

（3）在搅拌下，向上述分散液中逐滴加入溶解了5~10毫克谷胱甘肽GSH的水溶液1~5毫升，形成均质混合液-B，将其置于聚四氟乙烯100毫升内衬微型磁力高压反应釜中，在N₂保护和100~200摄氏度下连续搅拌反应6~12 小时；

（4）反应结束后冷却产物至室温，然后在5000转/分钟的转速下离心5~10分钟，吸取上层液体在10000转/分钟的转速下离心5~10分钟，离心后的沉淀物经乙醇和二次蒸馏水反复洗涤2~5次，真空干燥后得到GSH表面修饰的钴离子配位硼量子点Co@BQDs样品。

2.一种采用权利要求1所述的制备方法制备得到的钴离子配位型硼量子点基于酶催化反应的乳酸荧光纳米生物探针检测乳酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）将权利要求1制备得到的Co@BQDs样品分散于乙醇中，在搅拌下向其中逐滴加入乳酸氧化酶LOx溶液，形成均质混合液-C，向其中加入乳酸LA，充分搅拌后形成反应混合液体系，其中所含Co@BQDs，LOx和LA的最终浓度调节为1~5毫克/毫升，5~10 U/毫升，0.01微克/毫升至10毫克/毫升；

（2）采用荧光光谱仪测量上述反应混合液体系的荧光发射光谱，然后通过拟合Co@BQDs的荧光发射峰相对强度与对应反应混合液体系中的LA浓度之间的线性关系，构建基于Co@BQDs和LOx酶催化反应的荧光纳米生物探针，用于乳酸的高特异性定量检测，其中乳酸浓度的线性检测范围为0.01微克/毫升至10毫克/毫升，检测限为0.01~0.1微克/毫升。