[发明专利]靶向乳腺癌肿瘤的基因递送系统及其制备方法和应用

说明书

本申请公开了了一种靶向乳腺癌肿瘤的基因递送系统及其制备方法和应用，所述靶向乳腺癌肿瘤的基因递送系统包括靶向乳腺癌肿瘤的基因递送载体以及负载于所述递送载体上的CPTA1‑shRNA重组质粒。本申请的通过对CPT1A‑shRNA运输和转染，实现了CPT1A‑shRNA在乳腺癌肿瘤的靶向富集，增加了CPT1A‑shRNA在靶组织的富集程度，提高了乳腺癌治疗基因的治疗效果。

技术领域

本申请属于分子影像学和超声造影技术领域，具体涉及一种靶向乳腺癌肿瘤的基因递送系统及其制备方法和应用。

背景技术

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，主要是由于乳腺导管上皮出现恶性改变而产生。临床主要表现为乳腺肿痛、有肿块、腋窝下淋巴结出现肿大等。乳腺癌的治疗包括手术治疗、内分泌治疗、化疗、放疗等，目前仍以根治性手术为基础。然而手术治疗不仅给病人身体上带来极大痛苦，而且预后差、易感染，同时在患者心理上也会有一定的伤害。放疗虽有一定疗效，但同样无法根除，而且副作用大。

虽然化疗在乳腺癌的综合治疗中占有非常重要的地位，能够控制乳腺癌早期发生的全身播散，预防缓解乳腺癌术后的复发转移，有效地延长患者生存期，但是因其无组织及器官特异性，药物呈全身分布，对正常组织也有毒副作用，治疗效果不是很理想。

近年来，随着信号通路、细胞凋亡等分子生物学方法在肿瘤研究中的深入，乳腺癌分子靶点和靶向治疗逐渐成为抗乳腺癌研究的趋势和热点。乳腺癌肿瘤血管内皮细胞的表面高表达整合素等受体蛋白，能够特异性识别靶细胞，用于肿瘤的靶向治疗，可以实现乳腺癌治疗基因在靶细胞富集。

但目前尚未找到有效的基因递送系统实现乳腺癌治疗基因在靶细胞富集。

发明内容

针对现有靶向超声造影剂微泡设计的不足，本申请构建了一种磁性iRGD靶向微泡，其中iRGD起到靶向乳腺癌血管内皮中高表达的整合素受体的作用，磁性起到导向作用，通过iRGD靶向和磁性靶向两种定向作用的协同，可以有效提高微泡的寻靶效能，大幅提高其携带的基因在乳腺症靶组织的富集程度，提高乳腺癌基因治疗效果。

因此，本申请的第一方面提供一种靶向乳腺癌肿瘤的基因递送系统，其特征在于，包括靶向乳腺癌肿瘤的基因递送载体以及负载于所述递送载体上的CPTA1-shRNA重组质粒。

本申请的一种实现方式中，所述CPTA1-shRNA重组质粒包括CPTA1-1重组质粒和CPTA1-2重组质粒，所述CPTA1-1重组质粒的序列包括Seq ID No.1所示序列，所述CPTA1-2重组质粒的序列包括Seq ID No.2所示序列；Seq ID No.1：5'-CACCTTTGTCATACGCTGC-3'，Seq ID No.2：5'GGGCTAAAGTGACCATGAATG-3'。

本申请的一种实现方式中，所述靶向乳腺癌肿瘤的基因递送载体为磁性iRGD靶向微泡，所述CPTA1-shRNA重组质粒负载于所述磁性iRGD靶向微泡上。

本申请的一种实现方式中，所述磁性iRGD靶向微泡包括脂质外壳、包裹于所述脂质外壳内的气体以及磁性颗粒，所述脂质外壳的疏水端和所述气体相接触，所述脂质外壳的亲水端连接有磁性颗粒；所述CPTA1-shRNA重组质粒和所述脂质外壳相连接，以负载于所述磁性iRGD靶向微泡上；

优选的，所述脂质外壳和磁性颗粒的体积比为25～30:4～7；

优选的，所述脂质外壳和磁性颗粒的体积比为28:5。

本申请的一种实现方式中，所述脂质外壳包括脂质以及连接于所述脂质的阳离子聚合物，所述CPTA1-shRNA重组质粒和所述阳离子聚合物相连接，以负载于所述磁性iRGD靶向微泡上。