[发明专利]大豆ABC转运蛋白基因GmALS3在耐低磷和抗铝毒胁迫植物育种中的应用

权利要求书

1.SEQ ID NO：1所示的GmALS3基因在减少低磷胁迫对植物根系生长的抑制作用方面的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物为内源性ALS3基因功能缺失或ALS3基因表达水平被抑制的突变体。

3.SEQ ID NO：1所示的GmALS3基因在培育耐低磷植株中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述培育耐低磷植株所用的宿主植株为内源性ALS3基因功能缺失或ALS3基因表达水平被抑制的突变体。

5.一种构建耐低磷植物的方法，其特征在于，将含SEQ ID NO：1所示的GmALS3基因开放阅读框的真核基因过表达载体转化进植物基因组。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，当所述植物为拟南芥时，所述方法具体包括如下步骤：

(1)构建含GmALS3基因开放阅读框的基因过表达载体；

(2)将(1)的表达载体的转化于农杆菌；

(3)拟南芥种子种植培养3～4周，达盛花期，将拟南芥的荚和盛开的花朵都剪掉，留下完全未张开的花苞；

(4)拟南芥花苞全部浸泡在转化液中，摇晃侵染液10～120秒后拿出，取出后保鲜好置于黑暗的地方，隔2～4d再浸泡于转化液一次，共2～3次，再经过抗性筛选，表达分析和表型鉴定后，即可得耐低磷拟南芥。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述表达载体为pTF101s-35s载体，其开放阅读框含GmALS3基因序列。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中将表达载体的转化于农杆菌后，挑取阳性克隆扩大培养获得农杆菌菌体，用2～10％蔗糖溶液重悬农杆菌菌体并加入Silwet L-77配成转化液，其中所述的Silwet L-77与蔗糖溶液的质量比为1：1000～10000。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述转化液的OD₆₀₀为0.2～1.0。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的农杆菌为感受态农杆菌菌株GV3101。