[发明专利]一种新型嵌合体TsCas12a蛋白及制备技术在审
申请号: | 202110631842.7 | 申请日: | 2021-06-07 |
公开(公告)号: | CN113337489A | 公开(公告)日: | 2021-09-03 |
发明(设计)人: | 松阳洲;韩延华;卢蜜雨 | 申请(专利权)人: | 广州美格生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/70;C12Q1/6844 |
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地址: | 510000 广东省广州市海珠区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 嵌合体 tscas12a 蛋白 制备 技术 | ||
1.一种新型嵌合体TsCas12a蛋白及制备技术,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白氨基酸序列多个功能区域由SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.11组合而成;和/或,所述嵌合体TsCas12a蛋白核苷酸序列如SEQ ID NO.12-SEQ ID NO.22所示。
2.如权利要求1所述新型嵌合体TsCas12a蛋白及制备技术,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白氨基酸序列全长如SEQ ID NO.23所示;和/或,所述嵌合体TsCas12a蛋白核苷酸序列全长如SEQ ID NO.24所示。
3.如权利要求2所述新型嵌合体TsCas12a蛋白及制备技术,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白全长核苷酸序列导入pET-28-ccdB-CmR载体中,并转入大肠杆菌进行诱导表达,通过亲和层及凝胶过滤得到所述TsCas12a蛋白。
4.如权利要求3所述新型嵌合体TsCas12a蛋白,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白与LbaCas12a具有相同的附属切割活性。
5.如权利要求4所述新型嵌合体TsCas12a蛋白,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白能耐受至少5%PEG 8K。
6.如权利要求5所述新型嵌合体TsCas12a蛋白,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白能耐受至少2% TritonX100。
7.如权利要求6所述新型嵌合体TsCas12a蛋白,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白能耐受至少2% NP-40。
8.如权利要求7所述新型嵌合体TsCas12a蛋白,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白能耐受至少2% Tween-20。
9.如权利要求8所述新型嵌合体TsCas12a蛋白,其特征在于,所述嵌合体TsCas12a蛋白能耐受至少10mM DTT。
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