[发明专利]血清vitronectin在AL型淀粉样变的诊断及疾病分期中的应用

说明书

本发明公开了医学诊断学技术领域的血清vitronectin(Vn)在AL型淀粉样变的诊断及疾病分期中的应用，该方法包括以下步骤：第一步：选取研究对象；第二步：收集并分离入选研究对象血浆；第三步：使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清vitronectin浓度，使用商品化的人vitronectin酶联免疫吸附法(ELISA)检测试剂盒(货号L170419709，Cloud‑Clore Corp)进行检测；第四步：使用SPSS 20.0进行统计分析；第五步：临床应用：血清vitronectin浓度作为临床血清标记物，协助AL型淀粉样变的诊断及严重程度评估，本成果为AL型淀粉样变的临床诊疗提供了新的无创血清学诊断标志物血清vitronectin，可以检测出疾病及预测疾病严重程度，便于对患者进行及时、个体精准化治疗。

技术领域

本发明涉及医学诊断学技术领域，具体为血清vitronectin在AL型淀粉 样变的诊断及疾病分期中的应用。

背景技术

AL型淀粉样变是一种蛋白质异常折叠疾病，异常的浆细胞克隆产生异常 的免疫球蛋白轻链或片段，异常折叠形成淀粉样纤维丝沉积于全身多个组织 和器官。发病率低，AL型淀粉样变性病发病率占0.3/10万人口，但由于缺乏 有效的治疗手段，中位数生存时间仅为20.4个月，5年生存率是19.6％，致 死率很高。由于发病隐匿，许多AL型淀粉样变性病患者起病时已有多器官受 累、处于疾病晚期，从而失去了治疗时机。早期诊断和早期治疗至关重要， 寻找无创性的早期诊断、疾病分期的诊断标志物可让患者临床获益。

我们的前期研究利用显微切割-质谱分析的蛋白组学方法，在AL型淀粉 样变的肾组织中沉积的淀粉样蛋白中检测到了大量的vitronectin(Vn)，而 正常瘤旁肾组织对照中未检测到vitronectin，提示vitronectin可能参与淀 粉样变性病的蛋白质异常折叠。早在上世纪80年代Dahlback等人利用免疫 组化方法发现vitronectin沉积于肾脏淀粉样沉积物中，2015年，Casadonte 和Winter利用质谱分析对沉积于组织的淀粉样物质进行分析，发现 vitronectin可沉积于不同类型的淀粉样纤维丝中，包括AApoAI、ALλ、ATTR 型淀粉样变。Shin等人的研究提示vitronectin可异常折叠形成的寡聚物或 者纤维丝结构可作为nidus，加速了淀粉样纤维形成最初阶段的成核作用。以 上研究提示vitronectin广泛沉积于淀粉样沉积物中，vitronectin在淀粉样 纤维丝形成过程中起着重要的作用。

Vitronectin(Vn)，又称S蛋白，是一种存在于血液、羊水、尿液和部 分组织的多功能粘附蛋白，血清中的含量为0.1-0.4mg/ml，主要由肝细胞产 生，此外视网膜、脑组织、血管平滑肌细胞、血小板、单核细胞、巨噬细胞 及成纤维细胞均可产生少量的Vn。Vn为含有478个氨基酸的单链多肽，其编 码基因位于17号染色体q11位置，长4.5-5kb，由8个外显子和7个内含子 组成，根据vitronectin的功能特性，将vitronectin分为5个区域。根据 其功能区域，vitronectin生理条件下主要参与细胞粘附、凝血功能、免疫防 御等。

但血清vitronectin如何参与组织淀粉样纤维丝的形成？血清 vitronectin水平是否可对淀粉样变的诊断和严重程度进行预测，既往尚未被 研究。因此，本研究为首次评估血清vitronectin与淀粉样变的相关性极其 诊断价值。

发明内容

本发明的目的在于提供血清vitronectin在AL型淀粉样变的诊断及疾病 分期中的应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：血清vitronectin在AL型 淀粉样变的诊断及疾病分期中的应用，该方法包括以下步骤：

第一步：选取研究对象，并签署研究知情同意书；

第二步：收集并分离入选研究对象血浆；

(1)抽取研究对象外周血5ml，放置于惰性分离胶促凝管；