[发明专利]基于比率型比色检测亚硝酸根离子的方法

说明书

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种基于比率型比色检测亚硝酸根离子的方法，包括：向2 mL离心管中依次加入25μL 1 mg/mL的hollow MnFeO悬浮液、30μL 5 mM的TMB溶液、1440μL 0.2 M醋酸盐缓冲溶液，混合均匀；分别加入不同浓度的NO₂^‑，所述NO₂^‑在体系内的最终浓度分别为3.33μM、6.67μM、10μM、13.33μM、20μM、33.33μM、50μM、66.67μM、83.33μM、100μM、120μM、133.33μM；用紫外‑可见吸收分光光度计测定吸收光谱，绘制标准工作曲线；将待测的NO₂^‑样品测定吸收光谱，与标准工作曲线进行对比，即可获得样品的NO₂^‑浓度。本发明利用hollow MnFeO+TMB体系的氧化产物TMBox与亚硝酸根发生重氮化反应，实现亚硝酸根的间接检测，检测过程条件温和，检测限低至0.2μM，可实现对食品中亚硝酸根的检测。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，涉及亚硝酸根的检测方法，尤其涉及一种基于比率型比色检测亚硝酸根离子的方法。

背景技术

亚硝酸盐是含有亚硝酸根(NO₂^-)的工业盐，也是常见的食品添加剂，使用时必须严格控制用量，否则会导致亚硝酸盐中毒，给人体造成多种伤害，产生多种疾病。例如，过多的亚硝酸盐进入人体后，可以将血液中正常的血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，使血红蛋白失去携氧能力，导致组织缺氧，扩张外周血管；亚硝酸盐能在胃酸的作用下，与食物中的仲胺、叔胺和酰胺等反应生成强致癌物亚硝胺，诱发胃癌、食道癌的发生。除此之外，亚硝胺还能通过胎盘进入胎儿体内，对胎儿有致畸作用。因此，探究简单、快速、有效检测亚硝酸根的方法对环境和食品卫生具有十分重要的意义。

目前亚硝酸根的检测方法主要有色谱法、电化学法、比色法以及表面增强拉曼光谱法等方法。例如：

中国专利CN108614059B《疏水性低共熔溶剂涡旋辅助分散液液微萃取-高效液相色谱法检测亚硝酸根的方法》公开了一种利用高效液相色谱法检测亚硝酸根的方法，该方法利用亚硝酸根与对硝基苯胺及二苯胺在酸性条件下发生重氮化反应生成红色偶氮化产物，然后以疏水性低共熔溶剂作为涡旋辅助分散液液微萃取的萃取剂对反应液中的偶氮化合物进行分离、富集，再通过高效液相色谱法对亚硝酸根偶氮化产物进行检测，从而实现对亚硝酸根的间接检测。

中国专利CN106198693B《检测溶液中亚硝酸根离子浓度的方法》公开了一种利用电化学法检测溶液中亚硝酸根离子浓度的方法，该方法通过制备羧基化石墨烯/聚吡咯/壳聚糖修饰电极，然后根据亚硝酸根离子的示差脉冲伏安曲线，利用三电极体系通过示差脉冲伏安法实现对亚硝酸根的直接检测。

中国专利CN104614370B《一种基于纳米金的快速检测亚硝酸根的方法》公开了一种利用紫外可见分光光度计快速检测亚硝酸根的方法，该方法利用巯基苯胺的酸性水溶液与亚硝酸根的标准溶液反应一段时间后加入纳米金溶胶，通过紫外可见分光光度计测定纳米金溶胶的吸光度，以685nm与520nm处吸光度的比值为纵坐标，以亚硝酸根标准溶液浓度为横坐标，拟合得到亚硝酸根的标准曲线，从而实现对亚硝酸根的定量检测。

中国专利CN102998298B《表面增强拉曼光谱快速检测亚硝酸根方法及其应用》公开了一种利用表面增强拉曼光谱快速检测亚硝酸根的方法，该方法利用亚硝酸根离子与重氮-偶合试剂在酸性或弱碱性条件下生成偶合染料，通过表面增强拉曼测定偶合染料的量间接实现对亚硝酸根的定性和定量检测。

上述已公开的亚硝酸根检测方法虽然具有一定的检测效率，但仍具有以下缺点和不足：

(1)有些检测方法操作相对复杂，检测仪器设备相对昂贵；

(2)有些检测试剂成本相对较高，保存条件要求高。

发明内容