[发明专利]一种丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒及其应用，所述丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒包括：丙型肝炎病毒抗原的包被板、酶结合物和化学发光底物。本发明制备的试剂盒检测抗体，具有特异性强、重复性好、灵敏度高的效果。

技术领域

本发明属于体外诊断检测技术领域，具体涉及一种丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒及其应用。

背景技术

丙型病毒性肝炎是由丙肝病毒（HCV）所引起，主要是通过输血或血制品、血透析、单采血浆还输血球、肾移植、静脉注射毒品、性传播、母婴传播等传染引起的。丙肝分布较广，更容易演变为慢性、肝硬化和肝癌。HCV的传播途径主要包括：血液传播、性传播、母婴传播、部分HCV感染者的传播途径不明确。

至今尚未成功研制出有效的疫苗预防丙型肝炎，因此，防治丙肝的有效途径是早期诊断、早期治疗。目前丙型肝炎的实验室诊断方法有：HCV血清学检测，HCV RNA、基因型和变异检测。HCV RNA检测特异性好、灵敏度高，对设备和操作人员的要求较高，在感染者的体内水平具有不稳定性，因此该法具有局限性。HCV基因型和变异检测结果有助于判定治疗的难易程度及制定抗病毒治疗的方案，但价格较高，耗时较长，不适用于普筛。常用的HCV血清学检查采用的是酶联免疫法(ELISA)，化学发光免疫分析法(CLIA)和重组免疫印迹法(RIBA)，抗HCV抗体是血清学检测的标志。ELISA常利用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载体，将待测抗原或抗体固定于固相载体表面，再用酶标记的抗原或抗体与其特异性反应，加入底物后，用酶标仪通过显色反应判断结果，该法适用于大批量样本的检测，但其灵敏度和特异性不太高，自动化程度低，容易出现操作失误引起结果误判。重组免疫印迹法(RIBA)是HCV感染的确证试验，主要解决ELISA试验中出现的假阳性，提高了特异性，但对于阳性结果的判断，RIBA不能提供更多相关HCV感染的信息，也不经济。化学发光免疫分析法(CLIA)是在酶免疫分析的基础上结合了高灵敏度的化学发光测定技术和磁性微粒分离技术，该法利用顺磁性微粒作为固相载体，体积小、比表面积大，扩大了反应面积，提高了检测的灵敏度，检测时需配套使用全自动化学发光仪器和配套试剂，自动化程度高。

然而，目前采用的化学发光免疫法检测丙型肝炎抗体，易出现假阳性或假阴性的现象。仍需开发一种检验灵敏度高、特异性强且重复性好的丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒，能够快速准确的鉴定丙型肝炎病毒。

本发明还提出上述丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒的应用。

根据本发明第一方面实施方式的丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒，所述试剂盒包括丙型肝炎病毒抗原的包被板、酶结合物和化学发光底物。

在本发明的一些实施方式中，所述试剂盒还包括阴性对照、阳性对照、样品稀释液、浓缩洗涤液和终止液。

在本发明的一些实施方式中，所述丙型肝炎病毒抗原的包被板的制备包括以下步骤：采用包被缓冲液对丙型肝炎病毒抗原进行稀释后包板，即得丙型肝炎病毒抗原的包被板。

在本发明的一些实施方式中，所述丙型肝炎病毒抗原与包被缓冲液的体积比为1：（500~8000）。

在本发明的一些实施方式中，所述包被缓冲液为含0.01~0.05% NaN₃的0.1%碳酸盐缓冲液，pH为7.5~9.0。

在本发明的一些实施方式中，所述酶结合物为酶标记抗人IgG单克隆抗体。

在本发明的一些实施方式中，所述的酶标记抗人IgG单克隆抗体为辣根过氧化物酶标记的抗人IgG单克隆抗体。

在本发明的一些实施方式中，酶结合物中采用酶标稀释液进行稀释，酶结合物与酶标稀释液的体积比为1：（500~10000）。