[发明专利]一种鉴别棘头梅童鱼南北群体通用的遗传性别分子标记、引物及其应用

说明书

本发明公开了一种鉴别棘头梅童鱼南北群体通用的遗传性别分子标记、引物及其应用。所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，具有缺失SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的个体，为遗传雄性棘头梅童鱼。该遗传性别分子标记具有对南部群体和北部群体通用，对鱼体伤害小，适用整个生活史，适用材料范围更广等优点。

技术领域

本发明涉及水产生物技术领域中的鱼类遗传性别鉴定和性别控制技术，尤其涉及一种鉴别棘头梅童鱼南北群体通用的遗传性别分子标记、引物及其应用。

背景技术

染色体水平的研究具有宏观与直观的优势，与各种组学和分子生物学研究链接并互补，是遗传研究的重要内容。性染色体的识别、结构特征与进化研究是遗传学和进化生物学的研究热点之一。鱼类作为低等脊椎动物，具有丰富多样的性别决定模式，是研究脊椎动物性染色体结构与进化的理想模式系统。了解其性别决定机制可以改进性别控制和生殖控制技术。另外，鱼类的性别还与其繁殖及许多重要经济性状紧密相关，因此性别控制在水产养殖中受到了广泛关注。

随着分子生物学技术的发展，目前已有多种类型的DNA分子标记被开发出来，其中主要包括(1)限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)；(2)随机扩增多态性DNA(randomly amplified polymorphic DNA，RAPD)；(3)扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP)；(4)微卫星标记(microsatellite)；(5)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)。利用上述分子标记技术，已经有许多物种的性别特异的分子标记被开发出来，但不同物种其基因组序列结构不同，一个物种的性别特异分子标记通常不能用于其他物种的遗传性别进行鉴定。特定物种的性别特异分子标记通常需要专门开发。

棘头梅童鱼(Collichthys lucidus)属鲈形目，石首鱼科，梅童鱼属，主要分布于西太平洋区，包括中国、朝鲜半岛西海岸、日本、菲律宾沿岸等，是亚洲沿海地区广泛食用的一种重要的海洋鱼类。棘头梅童鱼体型大小存在雌雄二态，雌性个体大于雄性个体，性别控制相关技术具有商业应用潜力。性别分子标记是开发性别控制技术的重要工具。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鉴别棘头梅童鱼南北群体通用的性别分子标记，以及用于鉴定或辅助鉴定南部群体和北部群体的棘头梅童鱼的性别的引物。

为实现上述目的，本发明提供一种鉴别棘头梅童鱼南北群体通用的遗传性别分子标记，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，具有缺失SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的个体，为遗传雄性棘头梅童鱼。

本发明还提供一种用于检测所述遗传性别分子标记的引物，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

本发明还提供一种用于检测所述分子标记的试剂盒，其特征在于，包括所述引物。

本发明还提供一种鉴定棘头梅童鱼南北群体性别的分子标记的方法，其特征在于，使用所述的引物或试剂盒中的引物，对待测的南北群体棘头梅童鱼进行所述分子标记的检测，以确定所述待测南北群体棘头梅童鱼的遗传性别。

进一步，方法为，

获取待检测棘头梅童鱼的DNA；

使用所述的引物进行PCR扩增；

电泳检测并判断。

进一步，所述PCR扩增的体系为：当反应总体积为20μL时，具体反应体系为ddH₂O13.4μL；10×Buffer 2μL；2.5mM的dNTP 1.6μL；10mM的上游引物0.4μL；10mM的下游引物0.4μL；Taq酶0.2μL；30ng/μL的DNA模板2μL。