[发明专利]一株植物乳杆菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）Kmust-Li01，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.21266。

2.权利要求1所述植物乳杆菌Kmust-Li01的高密度发酵方法，其特征在于：按体积比2%～5%的接种量将植物乳杆菌Kmust-Li01种子液接种到MRS液体培养基中，在35～38℃、pH6.2～6.4、搅拌、溶氧量小于1%条件下发酵，发酵过程中，当发酵培养至7～8h，葡萄糖残留量为0.04～0.06％时，以5～8mL/L·h的速率开始补充葡萄糖溶液，发酵培养至11～12h后，葡萄糖残留量为0.10～0.15％时，以10～15mL/L·h速率补充葡萄糖溶液，继续发酵至17～18h后，葡萄糖残留量为0.12～0.15％时，以9～12mL/min速率补充葡萄糖溶液，继续发酵1～2 h，完成发酵，其中葡萄糖溶液浓度为浓度900～1100g/L。

3.权利要求1所述植物乳杆菌Kmust-Li01的高密度发酵方法，其特征在于：在35～38℃、pH6.2～6.4、搅拌、溶氧量小于1%条件下发酵，发酵过程中，当发酵培养至7～8h，葡萄糖残留量为0.04～0.06％时，以5～8mL/L·h的速率开始补充葡萄糖溶液，发酵培养至11～12h后，葡萄糖残留量为0.10～0.15％时，以10～15mL/L·h速率补充葡萄糖溶液，发酵至14～15h后，葡萄糖残留量为0.05～0.10％时，以15～18mL/L·h速率补充葡萄糖溶液，继续发酵至17～18h后，葡萄糖残留量为0.12～0.15％时，以9～12mL/min速率补充葡萄糖溶液，继续发酵1～2 h，完成发酵，其中葡萄糖溶液浓度为浓度900～1100g/L。

4.根据权利要求2所述的高密度发酵方法，其特征在于：发酵液经5000～12000g离心去除上清后，在菌体中添加其质量3～5倍的冻干保护剂，混匀后冷冻干燥制得冻干菌粉，其中

冻干保护剂组成为8～12%脱脂乳粉、3～7%海藻糖、3～7%葡萄糖、维生素C 0.5～1.5%，蒸馏水1000mL，在115℃灭菌20min制得。

5.权利要求1所述的植物乳杆菌Kmust-Li01在制备能抑制病原微生物的饲料添加剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：病原微生物为大肠杆菌（Escherichia coli）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、志贺氏菌（Shigella Castellani）。