[发明专利]一种乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐的分析方法

说明书

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐的分析方法。本发明分析方法包括利用铁离子衍生化试剂衍生化待测样品乳酸左氧氟沙星氯化钠注射剂中的依地酸盐，得到供试样品a；采用HPLC方法对供试样品a中的依地酸盐进行测定；所述HPLC方法采用磷酸二氢钠溶液‑乙腈为流动相，C18柱为色谱柱。本发明利用铁离子直接衍生化样品，通过优化色谱条件，利用铁离子衍生保留时间短的特性，实现快速筛查和测定；然后对可疑的样品，利用铜离子衍生物保留时间长的特性，进行确证，有效避免了假阳性的发生，方法简单、快速、精准、重复性好。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐的分析方法。

背景技术

左氧氟沙星为第三代喹诺酮类抗生素，易与金属离子形成络合物而失去活性，Fe³⁺离子还容易与左氧氟沙星络合而使得乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的颜色变深(深棕色)，所以部分生产企业在处方中加入依地酸盐(依地酸二钠或依地酸钙钠)，依地酸盐与金属离子形成的络合物稳定性强于左氧氟沙星，能避免左氧氟沙星失去活性及注射液颜色变深，以及考核生产企业是否存在不按处方生产擅自添加或不添加依地酸盐的违法行为。

依地酸盐(EDTA)如果直接测定，易与样品和流动相中的金属离子络合，形成多个色谱峰而无法准确定量，所以考虑衍生化方法来测定样品号中的依地酸盐量。依地酸盐与常见金属离子的稳定常数的对数值(lgKMY)Fe³⁺为24.23、Cu²⁺为18.7、Ca²⁺为10.69，说明Fe³⁺稳定性最高，Cu²⁺次之，Fe³⁺和Cu²⁺均可置换Ca²⁺离子。

目前，注射液中依地酸盐的测定方法早有研究，一般都是利用HPLC法通过铁离子试剂来测定依地酸二钠含量来分析，且分析时间均较长。可通过优化HPLC法的色谱条件，缩短峰的保留时间来加快分析速度，但是若铁离子衍生依地酸二钠的保留时间变短，很可能出现假阳性现象，导致测定错误，而误判。如何获得快速、精准、效果好的依地酸盐分析方法是当前需要解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐的分析方法，该分析方法利用铁离子直接衍生待测样品乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐后，通过优化色谱条件，压缩分析时间，快速地测出依地酸盐含量，然后对可疑的样品，再利用铜离子衍生样品中依地酸盐，以衍生化后的峰保留时间是否与依地酸二钠标准溶液衍生化峰一致来进一步进行确证，该方法有效避免了假阳性的发生，方法简单、快速、精准、重复性好。

本发明提供一种乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐的分析方法，包括以下步骤：

S1：利用铁离子衍生化试剂直接衍生化待测样品乳酸左氧氟沙星氯化钠注射剂中的依地酸盐，得到供试样品a；

S2：采用HPLC方法对供试样品a中的依地酸盐进行测定；

所述HPLC方法采用磷酸二氢钠溶液-乙腈为流动相，C18柱为色谱柱。

上述技术方案中，通过利用铁离子直接衍生乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中依地酸盐(为依地酸二钠或依地酸钙钠)后，形成依地酸铁络合物(EDTA-Fe³⁺)，从而快速测定乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中的依地酸盐含量，其中依地酸盐含量以依地酸二钠(C₁₀H₁₄N₂Na₂O₈·2H₂O)计算。该方法直接用铁离子衍生化，无需对样品进行萃取，也无需对衍生化试剂调节pH，将铁离子衍生化和铜离子衍生化相结合，有效避免了假阳性的发生，方法简单、快速、精准、重复性好。

进一步地，所述分析方法还包括：