[发明专利]一种大熊猫干扰素的制备方法在审
申请号: | 202110641266.4 | 申请日: | 2021-06-09 |
公开(公告)号: | CN113185601A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 邱薇;李润;王文博;刘静 | 申请(专利权)人: | 唐山怡安生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/56 | 分类号: | C07K14/56;C12N15/70;C12N15/21 |
代理公司: | 北京象合知识产权代理事务所(普通合伙) 11893 | 代理人: | 封明艳;郑慧娟 |
地址: | 063000 河北省*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大熊猫 干扰素 制备 方法 | ||
1.一种大熊猫IFN-α3的原核表达方法,所述方法包括如下步骤:
(1)表达载体的构建:
根据GeneBank中大熊猫IFN-α3型基因序列(DQ392970),经过序列优化,克隆至pET32a表达载体上,
(2)重组蛋白的诱导表达
将表达菌活化后,重组质粒转化感受态细胞,得到工程菌RmelIFN-α3,RmelIFN-α3诱导表达,纯化表达产物,获得大熊猫IFN-α3。
2.如权利要求1所述的原核表达方法,所述基因序列优化是指去除信号肽并加入BamHI和XhoI酶切位点。
3.如权利要求1或2所述的原核表达方法,所述表达菌选用菌株RosettagamiB。
4.如权利要求1或2所述的原核表达方法,所述的纯化表达产物是指收集菌体后经超声破碎、镍柱纯化,得到纯化的目的蛋白。
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