[发明专利]一种用于检测氟喹诺酮类抗生素的试剂盒和检测方法有效
申请号: | 202110642295.2 | 申请日: | 2021-06-09 |
公开(公告)号: | CN113341149B | 公开(公告)日: | 2023-08-22 |
发明(设计)人: | 宁保安;孙铁强;刘肖;姚站馨;白家磊;高蔚娜;张予弦;韩振宇;郭长江 | 申请(专利权)人: | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/58;G01N21/76 |
代理公司: | 北京丰浩知识产权代理事务所(普通合伙) 11781 | 代理人: | 董超 |
地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 喹诺酮类 抗生素 试剂盒 方法 | ||
本发明涉及分析检测技术领域,具体讲,涉及一种氟喹诺酮类抗生素的检测试剂盒和检测方法。该试剂盒包括:氟喹诺酮类化合物的单克隆抗体、多孔化学发光酶标板、标记有生物素的氟喹诺酮类化合物、氟喹诺酮类化合物标准品、碱性磷酸酶的化学发光底物和偶联有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素的量子点微球。本发明的试剂盒和方法具有灵敏度高、检测范围宽、操作简单、特异性好等优点,对氟喹诺酮类化合物的超灵敏检测具有重要的实际意义,对于实现现场快速、超灵敏侦检技术具有很好的指导意义。
技术领域
本发明涉及分析检测技术领域,具体讲,涉及一种用于检测氟喹诺酮类抗生素的试剂盒和检测方法。
背景技术
氟喹诺酮抗生素(FQs)包括洛美沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、诺氟沙星(NOR)、环丙沙星、左氧氟沙星等。氟喹诺酮类药物的抗菌机制是选择性抑制拓扑异构酶IV和DNA促旋酶,从而阻碍细菌DNA复制。它们被广泛用于畜禽疾病以及人类疾病的预防和治疗。其中,诺氟沙星是新一代的氟喹诺酮类抗生素,其广泛使用已导致残留和积累在人体中,对人体健康和环境造成极大伤害。诺氟沙星不仅会对人体健康造成危害,而且还可能引起严重的耐药性,对人类的生存有直接和间接的危害。因此,检测诺氟沙星残留具有重要意义。
目前,氟喹诺酮抗生素的检测方法主要包括高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS),免疫分析和电化学分析。但是,基于仪器的传统方法存在一些缺点,包括复杂的样品预处理,检测周期长以及专门的技术人员来进行实验。因此,有必要开发一种用于检测诺氟沙星的灵敏、快速的方法。鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的首要发明目的在于提供一种用于检测氟喹诺酮类抗生素的试剂盒。
本发明的第二发明目的在于提供一种氟喹诺酮类抗生素的检测方法。
为了完成本发明的发明目的,采用的技术方案为:
本发明实施例提出一种用于检测氟喹诺酮类化合物的试剂盒,该试剂盒包括:氟喹诺酮类化合物的单克隆抗体、多孔化学发光酶标板、标记有生物素的氟喹诺酮类化合物、氟喹诺酮类化合物标准品和碱性磷酸酶的化学发光底物和偶联有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素的量子点微球,
优选的,该试剂盒包括:诺氟沙星单克隆抗体、多孔化学发光酶标板、标记有生物素的诺氟沙星化合物、诺氟沙星标准品和碱性磷酸酶的化学发光底物和偶联有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素的量子点微球。
本发明实施例还提出一种氟喹诺酮类化合物的检测方法,其特征在于,采用上述试剂盒,至少包括以下步骤:
S1、将所述氟喹诺酮类化合物抗体包被于多孔化学发光板,孵育、洗涤后,用BSA封闭;
S2、在所述多孔化学发光板的孔中添加所述标记有生物素的氟喹诺酮类化合物,然后添加所述氟喹诺酮类化合物标准品或待测样品,反应后洗涤;
S3、在所述多孔化学发光板的孔中继续添加所述偶联有量子点微球的碱性磷酸酶标记的链霉亲和素,孵育后洗涤;
S4、用酶标仪检测荧光,添加碱性磷酸酶的化学发光底物后,立即用化学发光免疫分析仪测量相对光单位;
S5、根据一系列稀释浓度的诺氟沙星标准品检测得到的荧光值和相对光单位分别绘制标准曲线;利用待测样品所对应的荧光值和相对光单位获得待测样品的浓度。
本发明至少具有以下有益的效果:
本发明的试剂盒和方法具有灵敏度高、检测范围宽、操作简单、特异性好等优点,对氟喹诺酮类化合物的超灵敏检测具有重要的实际意义,对于实现现场快速、超灵敏侦检技术具有很好的指导意义。
附图说明
图1为根据本发明某一实施方式中,量子点微球及QDs-FM@ALP-SA的透射电子显微镜图;
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