[发明专利]检测PGRMC1含量的试剂在制备诊断和预测多囊卵巢综合征的试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了检测PGRMC1含量的试剂在制备诊断和预测多囊卵巢综合征的试剂盒中的应用。本发明发现PCOS患者卵巢组织中平均PGRMC1蛋白的水平明显高于对照组人群。与对照组相比，PCOS组颗粒细胞中PGRMC1mRNA平均表达水平升高。因此可以将孕激素膜受体1作为PCOS患者的生物标记物在临床应用于诊断和预测多囊卵巢综合征，具有广阔的应用前景。

技术领域：

本发明属于医药领域，具体涉及检测人细胞膜孕激素受体(PGRMC1)含量的试剂在制备诊断和预测多囊卵巢综合征的试剂盒中的应用。

背景技术：

多囊卵巢综合征是常见的生殖内分泌代谢性疾病，是一种临床表现多样，以月经异常及不孕为主要表现，伴有以胰岛素抵抗为基础的多种糖脂代谢异常，可增加2型糖尿病、心脑血管疾病、子宫内膜癌、焦虑症及抑郁症等远期并发症，严重影响患者的生命质量、生育及远期健康。2013年中国大型流行病学调查显示：年龄在19-45岁中国汉族妇女中，PCOS的发病率为5.6％。PCOS的发病机制目前尚不明确，与遗传及环境因素密切相关。因此，积极探索PCOS的病因及发病机制已成为妇科内分泌研究最为热门的领域之一。

PGRMC1(孕激素膜受体1)最初被发现是孕酮结合蛋白复合体的一个组分，也被称为人细胞膜孕激素受体(human membrane progesterone receptor，Hpr6.6)。PGRMC1是高度保守的多功能蛋白质，存在于许多系统中，包括生殖系统。PGRMC1蛋白的结构包括一个单次跨膜区域和一个羧基末端细胞色素b5亚铁血红素结合域，PGRMC1可位于胞内、内质网和细胞膜中。近年来，接连有研究报道PGRMC1可与血红素、孕激素、类固醇以及部分蛋白结合的一种多蛋白复合物。PGRMC1目前已知的生物学功能是与血红素结合，PGRMC1与细胞色素b5具有同源性，细胞色素b5是激活细胞色素P450的一种血红素结合蛋白，PGRMC1可能在调节体内代谢、胆固醇合成、细胞的增殖及凋亡等途径起着重要作用。PGRMC1是具有激素受体特征，并且是糖脂质代谢重要调节因子。有大量研究报道，PGRMC1参与调节胆固醇及脂质合成，PGRMC1结合并激活P450蛋白甾醇14a-去甲基化酶Cyp51，该酶催化胆固醇合成途径中的重要反应。PGRMC1促进低密度脂蛋白受体、极低密度脂蛋白受体及葡萄糖转运蛋白-4(Glucose transporter-4，GLUT4)转移至细胞膜，从而调节脂质及葡萄糖的代谢。PGRMC1也能增加细胞膜上的胰岛素受体，参与调节胰岛素及PI3K-AKT信号通路，影响体内碳水化合物的代谢。PGRMC1在肝脏的脂质代谢也发挥重要作用，Lee等PGRMC1基因敲除小鼠的肝中甘油三酯蓄积水平显着增加，更易患非酒精性脂肪肝。

卵巢颗粒细胞与卵母细胞的关系十分密切，卵母细胞缺乏产生糖酵解和胆固醇代谢产物的能力，卵母细胞85％营养有卵巢颗粒细胞提供。卵巢颗粒细胞异常可能影响卵母细胞代谢，导致卵母细胞成熟困难。卵巢多囊样改变是PCOS重要的病理特征之一，其特点包括：卵泡募集增加、卵泡发育停滞、小卵泡的闭锁、无优势卵泡排出和颗粒细胞增殖。近年来，随着对卵巢颗粒细胞增殖及凋亡的研究取得巨大进步，研究发现颗粒细胞异常造成卵母细胞的成熟延迟，因此在PCOS中的作用逐渐引起学者的重视。

发明内容：

本发明的目的是提供检测PGRMC1(孕激素膜受体1)含量的试剂在制备诊断和预测多囊卵巢综合征的试剂盒中的应用。

本发明通过实验发现，PCOS患者卵巢组织中平均PGRMC1蛋白的水平明显高于对照组人群(平均光密度，PCOS vs.对照：0.21±0.12,vs.0.13±0.08,P0.01)。与对照组(n＝11例)相比，PCOS组(n＝11例)颗粒细胞中PGRMC1 mRNA平均表达水平升高(PCOS组0.22±0.11vs.对照组0.13±0.06)，两组间PGRMC1表达水平差异具有统计学意义(P＜0.05)。孕激素水平随着PGRMC1浓度水平升高而升高。

因此，本发明的第一个目的是提供检测PGRMC1(孕激素膜受体1)含量的试剂在制备诊断和预测多囊卵巢综合征的试剂盒中的应用。