[发明专利]一种保健食品中非法添加吡格列酮的快速检测方法

说明书

本发明公开了一种保健食品中非法添加吡格列酮的快速检测方法，包括以下步骤：(1)标准品待测液制备；(2)样品前处理：(21)称取适量样品，加无水甲醇振荡，置于超声萃取仪中超声10分钟，得提取液；(22)将提取液摇匀过滤；(3)表面增强激光拉曼光谱分析：取适量滤液作为待测液，依次加入表面增强试剂、酸化剂，记录820cm^‑1(±3cm^‑1)、1180cm^‑1(±3cm^‑1)、1210cm^‑1(±3cm^‑1)有无特征峰。本发明的方法简单方便，成本低廉，利于现场操作，能快速检测结果；能实现大量样品的定性分析；减少化学试剂的使用量，减少对操作人员的危害以及对环境的污染；速度快、低成本、易操作。

技术领域

本发明涉及保健品检测技术领域，特别涉及一种保健食品中非法添加吡格列酮的快速检测方法。

背景技术

吡格列酮为噻唑烷二酮类抗糖尿病药物，属胰岛素增敏剂，作用机制与胰岛素的存在有关，可减少外周组织和肝脏的胰岛素抵抗，增加依赖胰岛素的葡萄糖的处理，并减少肝糖的输出。吡格列酮主要不良反应为水肿、头疼、头晕、恶心、皮疹、低血糖反应等。严重不良反应表现为：心衰、严重肝功能异常、低血糖昏迷等。2011年11月国家食品药发布药品不良反应信息通报提示吡格列酮可引起膀胱癌的风险。保健食品作为一种特殊食品，具有调节机体的功能，不允许添加药物。

吡格列酮一般以盐酸吡格列酮的形式存在，目前盐酸吡格列酮的检测方法为《国家食品药品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件2009029》。该方法中，薄层色谱法用于快速筛查；高效液相色谱法用于定性检查；经快速筛查或定性检查结果为阳性的样品，需经液质联用方法验证后出具检验报告。其中用于快速筛查的薄层色谱法是将胶囊剂内容物、片剂或颗粒剂研细经三氯甲烷超声提取后过滤挥干，再加甲醇和三氯甲烷各1mL复溶作为供试液，取盐酸吡格列酮加甲醇制成1mg/mL的溶液，作为对照液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取供试液、对照液各5μL，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以二氯甲烷-四氯化碳-乙酸乙酯-无水甲酸(4:4:2:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外光灯(254mm)下检视，若供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上显有荧光淬灭斑点则为盐酸吡格列酮阳性，没有则为阴性。虽然该法相较高效液相色谱法操作简单且用时较短，但该法所用试剂种类较多，大多试剂有一定毒性，且人为的影响因素较大，实验重现性不好，实验用时大约30～60分钟。

拉曼光谱1928年被发现，1930年获得诺贝尔物理学奖，它普遍存在于一切分子中，能够可靠地提供分子的结构信息，不受各种溶剂的影响，随着激光光源的使用，激光拉曼光谱已经成为重要化合物的分析手段，广泛应用于刑侦鉴定、矿物质分析等领域，1974年Fleischmann M发现的表面增强拉曼散射使痕量物质检测成为可能。表面增强拉曼光谱技术(SERS)利用痕量分子吸附于Cu、Ag、Au等金属溶胶和电极表面，其拉曼光谱信号可增强10⁴～10⁶，克服了常规拉曼光谱法灵敏度低的缺点。该技术具有快速灵敏、信息丰富、选择性高等特点，但主要用于定性检测。近年来表面增强拉曼光谱技术已开始应用于很多非法添加物、功效成分等的检测。

为了克服上述现有检测方法与技术的不足，本发明提供一种基于表面增强拉曼光谱技术，灵敏、快速、便捷的保健食品中非法添加吡格列酮的快速定性检测方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种保健食品中非法添加吡格列酮的快速检测方法，采用拉曼光谱特征峰信号，选择820cm^-1(±3cm^-1)、1180cm^-1(±3cm^-1)、1210cm^-1(±3cm^-1)作为特征拉曼峰，定性准确，整个检测过程在15分钟内完成，实现快速定性、便捷、低成本检测。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：