[发明专利]一种石榴皮有效组分色素脱除方法

说明书

本发明涉及一种石榴皮有效组分色素脱除方法，该方法是将获得的石榴皮有效组分中的大分子色素类物质在反相色谱上的特殊的溶解‑沉淀‑吸附，在石榴皮有效组分的进样前中添加对色素溶解性能较好的甲醇、乙腈、甲酸溶剂，促使石榴皮有效组分中的色素在柱上的分离过程总保持溶解状态，直到被有效吸附。由于石榴皮中大分子色素类物质在反相色谱上保留很强，而极性较大的多酚类物质在反相色谱上保留较弱。调整液相色谱的洗脱强度，可以有效地将石榴皮多酚提取物中的大分子色素和多酚分开，从而达到脱色的效果，有效提高石榴皮有效组分的含量及色泽，从而为石榴皮的高值化综合利用提供有力支撑。

技术领域

本发明涉及一种石榴皮有效组分色素脱除方法。

背景技术

石榴是一种经济作用价值较高的水果，其干燥果皮简称石榴皮，具有涩肠止泻，止血，驱虫之功效。常用于久泻，久痢，便血，脱肛，崩漏，带下，虫积腹痛。石榴皮中富含多酚类化合物，具有较强的抗氧化、抗炎以及抗菌作用。然而，石榴皮中还富含缩合单宁类以及多酚氧化聚合所产生的大分子物质，颜色深红，使得石榴皮提取物中的小分子多酚类物质颜色加深，影响其生物活性的同时也造成了其品相不好。另外，大分子色素的水溶性较差，不利于石榴皮多酚提取物的进一步制剂应用及推广。

传统的脱色方法如活性炭脱色法会造成较大的多酚损失，且效果不佳；凝胶色谱或MCI树脂脱色价格昂贵，色素及多酚的死吸附严重，导致其在工业化应用范围受限。因此，为了提高石榴皮的综合利用附加值，开发一种能有效脱除石榴皮多酚提取物中大分子色素的方法十分必要。反相液相色谱法是应用范围很广的分离纯化技术，通常被用来各种极性范围的化合物的分离纯化。然而，反相液相色谱在分离大极性物质如多酚类化合物的过程中所使用的流动相中通常含有较高含量的水。高含量的水不利于大分子色素的溶解。因此，石榴皮多酚提取物水溶液在上样之后并初步分离之后，大分子色素分子将快速在色谱柱上产生沉淀，并蔓延至整个色谱柱，甚至随着流动相的冲洗而从色谱柱填料的填充空隙中流出，从而和多酚类物质共同洗脱出来，无法达到分离的效果。因此，在进样过程中引入部甲醇、甲酸、乙腈等对大分子色素溶解度良好的溶剂，在不引起溶剂效应的前提下进样至反相色谱柱分离。由于溶解状态的色素由于极性较大而被反相色谱填料有效吸附，从而保留在色谱柱上。而多酚类物质则可由含水量较高的流动相洗脱出，从而达到分离脱色的效果。该方法简单有效，填料可以重复使用，具有很高的产业化价值。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种石榴皮有效组分色素脱除方法，该方法基于专利申请号201911127266.1《具有强抗氧化及金黄色葡萄球菌抑制活性的石榴皮有效组分的制备方法》获得的石榴皮有效组分中的大分子色素类物质在反相色谱上的特殊的溶解-沉淀-吸附，在石榴皮有效组分的进样前中添加对色素溶解性能较好的甲醇、乙腈、甲酸溶剂，促使石榴皮有效组分中的色素在柱上的分离过程总保持溶解状态，直到被有效吸附。由于石榴皮中大分子色素类物质在反相色谱上保留很强，而极性较大的多酚类物质在反相色谱上保留较弱。调整液相色谱的洗脱强度，可以有效地将石榴皮多酚提取物中的大分子色素和多酚分开，从而达到脱色的效果，有效提高石榴皮有效组分的含量及色泽，从而为石榴皮的高值化综合利用提供有力支撑。本发明所述的方法简单快速，脱色效率高，为石榴皮多酚提取物的脱色，提高产品质量提供了一种有效的方法。

本发明所述的一种石榴皮有效组分色素脱除方法，按下列步骤进行：

a、将安石榴苷含量为60.6％的石榴皮有效组分，溶于2L水中，超声溶解，添加甲酸至甲酸体积分数为3％-10％，或添加甲醇至甲醇体积分数为3％-10％，或添加乙腈至乙腈体积分数为3％-10％，所得溶液待用；

b、取反相C18色谱柱，连接于中试制备液相色谱仪上，以体积比为12:88-15:85的甲醇-0.1％甲酸水为流动相，或以体积比为8:92-11:89的乙腈-0.1％甲酸水为流动相，或以体积比为7:93-10:90的四氢呋喃-0.1％甲酸水为流动相，流速控制为600mL/min，平衡色谱柱15min，控制柱温在10℃-35℃，以紫外检测器检测色谱信号，检测波长254nm和366nm，待用；