[发明专利]一种基于细胞膜荧光标记的血小板抗体筛查方法及其应用在审
| 申请号： | 202110646143.X | 申请日： | 2021-06-09 |
| 公开（公告）号： | CN113447665A | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 苑召虎;魏亚明;谌丹丹 | 申请（专利权）人： | 广州市第一人民医院（广州消化疾病中心;广州医科大学附属市一人民医院;华南理工大学附属第二医院） |
| 主分类号： | G01N33/96 | 分类号： | G01N33/96;G01N33/58;G01N33/543 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 颜希文 |
| 地址： | 510180 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 细胞膜 荧光 标记 血小板 抗体 方法 及其 应用 | ||
1.一种基于细胞膜荧光标记的血小板抗体筛查方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：用细胞膜荧光染料对血小板进行荧光标记，得到荧光标记的血小板；
S2：向包被有第二抗体的固相载体中加入待检样本孵育；
S3：将步骤S1获得的荧光标记的血小板加入孵育后的待检样本中，孵育、离心后直接通过荧光显微镜观察血小板的聚集分布情况，进而判断待检样本中是否含有抗血小板抗体。
2.根据权利要求1所述血小板抗体筛查方法，其特征在于，所述细胞膜荧光染料包括PKH 26、PKH 67、1,1′-dioctadecyl-3,3,3′3′-tetramethylindocarbocyanineperchlorate或3,3′-dihexadecyloxacarbocyanine perchlorate。
3.根据权利要求1所述血小板抗体筛查方法，其特征在于，所述第二抗体为小鼠抗人IgG多克隆抗体、兔抗人IgG多克隆抗体、羊抗人IgG多克隆抗体、小鼠抗人IgG单克隆抗体、兔抗人IgG单克隆抗体、羊抗人IgG单克隆抗体或重组的抗人IgG抗体。
4.根据权利要求1所述血小板抗体筛查方法，其特征在于，所述固相载体为U型底ELISA微孔板。
5.根据权利要求1所述血小板抗体筛查方法，其特征在于，所述待检样本为待检血清或血浆样本。
6.一种基于细胞膜荧光标记的血小板抗体筛查试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括由细胞膜荧光染料标记的血小板和包被有第二抗体的固相载体。
7.根据权利要求6所述血小板抗体筛查试剂盒，其特征在于，所述细胞膜荧光染料包括PKH 26、PKH 67、1,1′-dioctadecyl-3,3,3′3′-tetramethylindocarbocyanineperchlorate或3,3′-dihexadecyloxacarbocyanine perchlorate。
8.根据权利要求6所述血小板抗体筛查试剂盒，其特征在于，所述固相载体为U型底ELISA微孔板；所述第二抗体为为小鼠抗人IgG多克隆抗体、兔抗人IgG多克隆抗体、羊抗人IgG多克隆抗体、小鼠抗人IgG单克隆抗体、兔抗人IgG单克隆抗体、羊抗人IgG单克隆抗体或重组的抗人IgG抗体。
9.根据权利要求6所述血小板抗体筛查试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性质控血清和阴性质控血清；所述阳性质控血清为含有抗-HPA抗体和/或抗-HLA抗体的血清；所述阴性质控血清为不含抗血小板同种抗体的血清。
10.权利要求6所述血小板抗体筛查试剂盒在血小板抗体筛查中的应用。
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