[发明专利]一种MAP3K10基因片段及引物在制备颅内动脉瘤检测试剂盒中的用途

说明书

本发明公开了一种MAP3K10基因片段在颅内动脉瘤的临床诊断检测试剂盒的开发及其应用，所述的检测试剂盒内包括一对MAP3K10基因甲基化特异性扩增引物及一个甲基化特异性测序引物：其中上游引物具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，下游引物具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，甲基化特异性测序引物如SEQ ID NO.3所示，优点是该诊断试剂盒可以方便快捷地在分子水平上实现对颅内动脉瘤的检测，检测效率高，针对性强，同时，以MAP3K10基因甲基化为靶点的药物有望成为颅内动脉瘤辅助诊断、检测和筛选的一种新手段。

技术领域

本发明涉及颅内动脉瘤的辅助诊断技术领域，具体涉及MAP3K10基因片段在颅内动脉瘤的临床诊断检测试剂盒的开发及疗效监测和预后判断领域的应用。

背景技术

颅内动脉瘤(Intracranial aneurysms，IA)是一种死亡率极高的脑血管病，其主要是指颅内动脉血管壁脆弱等原因导致内腔局限性异常膨胀形成一种突出的瘤状。大多数IA破裂前没有任何症状，一旦破裂出血患者死亡率高达40％，并且半数在48小时内死亡。患者即使幸存下来，也有1/3可发生再次出血，发生再次出血者的死亡率高达70-80％。IA发病年龄一般在40-50岁之间，发病凶而急，手术抢救后患者也可能留下不同程度的残疾和后遗症，给患者家庭和社会带来沉重的负担。IA的发病原因尚不十分清楚。目前，研究认为IA的发生、形成是一个复杂的多基因，多生物因子共同作用的过程。吸烟饮酒等不良生活习惯等多种因素通过表观遗传影响相关基因DNA甲基化进而改变基因表达参与到IA的病理过程中。因此，表观遗传学变化在IA致病机理研究中越来越受到重视。

丝裂原活化蛋白3激酶10(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase10，MAP3K10)是MAPK信号通路中的一个激酶，通过多种途径作用于JNK信号通路，在血管炎症，细胞凋亡，神经元分化等方面发挥着重要作用。MAP3K10在人体大脑皮层，海马区，杏仁体，小脑，下丘脑以及肌肉组织中均有着丰富的表达量。人体中MAP3K10含量的平衡有着重要的作用，其基因持续高表达将导致MAPK信号通路中JN和P38的激活，进而促进脑血管病变后神经细胞凋亡以及神经炎症的发生。DNA甲基化是影响基因表达的一个重要因素，高度甲基化能有效降低基因的表达。目前，国内外没有公开任何关于MAP3K10基因甲基化与颅内动脉瘤相关的研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供检测效率高，针对性强的一种辅助诊断颅内动脉瘤的检测试剂盒的开发及其应用，其中MAP3K10基因甲基化水平与颅内动脉瘤的患病率呈负相关。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

一组MAP3K10甲基化扩增引物在制备颅内动脉瘤检测试剂盒中的用途，所述的检测试剂盒内包括一对MAP3K10基因甲基化特异性扩增引物及一个甲基化特异性测序引物：

甲基化特异性上游引物的核苷酸序列：

5’-ATTTGGAGTTGGAGAGTTTTAAG-3’；

甲基化特异性下游引物的核苷酸序列：

5’-Biotin-CTAAATACAAAACCCCTCACTCACCAAAAC-3’；

甲基化特异性测序引物的核苷酸序列：

5’-GAGAGTTTTAAGAAGGATTT-3’。

一种辅助诊断颅内动脉瘤的检测试剂盒的应用，所述的检测试剂盒能用于颅内动脉瘤辅助诊断、疗效预后或筛查药物。