[发明专利]一种基于不同粒径的纳米金比色阵列传感器的氨基糖苷类抗生素检测方法

权利要求书

1.一种基于不同粒径的纳米金比色阵列传感器的氨基糖苷类抗生素检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1：构建纳米金比色阵列传感器：制备三种粒径在10～50nm范围内的表面带负电荷的纳米金颗粒，分别构成纳米金比色阵列传感器的三个通道；

S2：将步骤S1制得的三通道不同粒径的纳米金颗粒分别与待测样品溶液进行反应，然后将试剂管置于暗箱内，在同等亮度的条件下拍摄，根据图片的颜色绘制出AGs可视化特异差谱图；

S3：对步骤S2反应后的样品溶液进行七次重复样吸光度检测，取五次最佳值，利用紫外数据(A_n-A₀)/A₀绘制三维散点图；

S4：将步骤S2和步骤S3得到的AGs可视化特异差谱图和三维散点图与多种AGs标准可视化特异差谱图和三维散点图进行对比分析，即可确定待测样品中的AGs种类；

S5：通过该种类AGs的线性拟合方程，代入y值即可求得待测样品溶液中该种类AGs的浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，三通道的纳米金颗粒的粒径分别为10nm、22nm和40nm。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，粒径为10nm的纳米金颗粒的制备步骤如下：加入去离子水使1mL质量分数为1％的HAuCl₄·3H₂O溶液定容至100ml，倒入100mL圆底烧瓶中，然后将混合溶液加热至沸腾；在沸腾的同时快速加入5mL现配的质量分数为1％的柠檬酸三钠水溶液，待溶液颜色由黑变红后开始计时，继续沸腾7-10min后停止加热，冷却至室温后转移至洁净容器中并放入4℃冰箱保存。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，粒径为22nm的纳米金颗粒的制备步骤如下：加入去离子水使1mL质量分数为1％的HAuCl₄·3H₂O溶液定容至100ml，倒入100mL圆底烧瓶中，剧烈搅拌并加热，在煮沸的同时快速加入1.5mL质量分数为1％的现配的柠檬酸三钠溶液，8-10min后，将反应容器从加热元件上移除，使其冷却至室温后，转移至洁净容器中并放入4℃冰箱保存。

5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，粒径为40nm的纳米金颗粒的制备步骤如下：加入去离子水使1mL质量分数为1％的HAuCl₄·3H₂O溶液定容至100ml，倒入100mL圆底烧瓶中，强力搅拌并加热回流至沸腾；然后将1130μL质量分数为1％的新鲜柠檬酸三钠溶液快速加入烧瓶中，持续加热15min后停止加热，再强力搅拌15min即得到所需AuNPs溶液，冷却至室温后转移到洁净容器中置于4℃冰箱保存。

6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中的反应步骤为：取3份20μL待测样品溶液分别于3个离心管中，加入980μL去离子水稀释，振荡；分别加入步骤S1制备好的三种不同粒径纳米金溶液各2mL，振荡，静置10～15min。

7.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中，首先用紫外分光光度计进行7个重复样的吸光度比值检测，取五个最佳值；然后取紫外数据中的A650nm/A550nm作为An，扣除空白样品的吸光度A0，即以(An-A0)/A0作为紫外信号值；最后通过软件spss、origin绘制三维散点图。