[发明专利]一种表达细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的免疫细胞及其应用

说明书

本发明公开了一种表达细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的免疫细胞及其引用；所述免疫细胞的细胞膜上表达细胞因子受体融合型嵌合抗原受体，并且在所述细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的胞内域结构中融合了细胞因子受体胞内结构域。该免疫细胞可以在接受抗原刺激的情况下增强细胞的增殖能力，减少肿瘤微环境影响，增强免疫细胞的杀瘤活性，从而减弱肿瘤微环境对免疫细胞的负调控，减少免疫细胞的耗竭，并且通过与细胞因子受体结合，激活相应JAK和STAT信号通路，诱导这些细胞分泌IFN‑γ、穿孔素和颗粒酶等多种活性物质，抑制肿瘤细胞的生长，增强抗肿瘤能力，减少肿瘤微环境对免疫细胞的抑制。

技术领域

本发明涉及生物细胞技术领域，特别是涉及一种表达细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的免疫细胞及其应用。

背景技术

近几年来，肿瘤免疫疗法发展迅速，尤其是过继性细胞疗法(ACT)，即指从病人体内分离出T细胞、NK细胞等免疫细胞，通过体外修饰扩增培养，随后回输入患者体内进行肿瘤治疗的方法。2013年，肿瘤的免疫疗法被Science杂质评为“十大突破”之首。

CAR-T和TCR-T是过继性细胞疗法重要的组成部分，尤其CAR-T疗法，在血液肿瘤的治疗上取得了显著的成就，取得了较高的缓解率，典型的CAR结构由三部分组成，胞外识别肿瘤抗原的scFv、铰链和跨膜结构域、胞内共刺激信号和激活结构域。第一代的CAR并不包含胞内共刺激信号，CAR-T细胞的杀伤活性较低且生存时间较短。因此，第二代CAR开始加入共刺激信号如CD28和4-1BB，采用不同的共刺激信号的CAR-T细胞的特性也不尽相同，CD28增强了CAR-T细胞的杀伤活性而4-1BB则增强CAR-T细胞杀伤活性的同时延长了CAR-T细胞的生存时间。随后，出现了共同表达两个共刺激信号域的三代CAR，然而其抗肿瘤效果并不如二代CAR-T。因此，现在临床应的主要为二代CAR-T细胞。

CAR-T疗法不仅在血液肿瘤的治疗上成果显著，而且商业化进展顺利，美国FDA于2017年正式批准了两种CAR-T药品上市。尽管CAR-T细胞疗法在血液肿瘤的治疗上大放异彩，但对于实体瘤却并没有较好的治疗效果，缓解率低且容易发生脱靶等毒副作用。

发明内容

基于此，有必要针对上述问题，提供一种表达新型嵌合抗原受体结构的免疫细胞，优化了免疫细胞的杀伤功能，减少耗竭，减少肿瘤微环境对免疫细胞的抑制。

一种表达细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的免疫细胞，该免疫细胞的细胞膜上表达细胞因子受体融合型嵌合抗原受体，并且在所述细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的胞内域结构中融合了细胞因子受体胞内结构域。

在其中一个实施例中，细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的基因构建于一个质粒表达框后转入免疫细胞中。

在其中一个实施例中，细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的基因构建所述质粒表达框后通过递送系统转入所述免疫细胞。

在其中一个实施例中，递送系统包括慢病毒、逆转录病毒、普通质粒载体、附加体载体、纳米递送系统、电转导及转座子中的一种或几种。

在其中一个实施例中，细胞因子受体融合型嵌合抗原受体包括细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内结构域。

在其中一个实施例中，细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的胞外结构域包括抗原结合结构域；所述细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的跨膜结构域包括CD28的铰链区和CD28的跨膜结构域、CD8的铰链区和4-1BB的跨膜结构域、CD8铰链区和ICOS的跨膜结构域；所述细胞因子受体融合型嵌合抗原受体的细胞内结构域包括共刺激信号传导区、细胞因子受体胞内区和CD3ζ链部分。共刺激信号传导区指包括共刺激分子的细胞内结构域的一部分，共刺激分子为淋巴细胞对抗原的有效应答所需要的细胞表面分子。