[发明专利]体外诊断检测试剂及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及体外诊断检测试剂及其制备方法和应用，检测试剂包括中空金纳米颗粒和负载于中空金纳米颗粒表面的功能分子，中空金纳米颗粒为中空多孔结构，且中空金纳米颗粒的粒径为50‑120nm，吸收波长为500nm‑700nm，功能分子为抗体、抗原、核酸或标志蛋白。本发明的检测试剂能够提高疾病的体外诊断灵敏度和稳定性。

技术领域

本发明涉及药学技术领域，特别涉及体外诊断检测试剂及其制备方法和应用。

背景技术

免疫层析技术是一种将色谱层析技术与免疫技术相结合的免疫分析技术，目前市场上的免疫层析试纸条多使用胶体金或者胶体硒作为检测标志物，具有操作简便，成本低，快速，检测标本种类多等优点，在疾病诊断、兽药残留、食品安全检测等领域具有广泛的用途。胶体金免疫层析试纸条的基本原理是利用抗原抗体结合反应，在层析过程中，胶体金标记物随样品溶液通过毛细作用在构建好的试纸条上移动，当移动到反应垫上时与测试线T上埋好的相应受体结合被固定，聚集后显红棕色，T线的颜色深浅大致反映了样品中待测物的含量，同时设置质控线C，以验证检测结果是否有效。基本检测方法包括双抗体夹心法：用于较大分子抗原检测；间接法：用于抗体检测；竞争法：用于小分子抗原检测。

常见的产品例如早孕试纸条，由样品垫，金标垫，反应垫和吸水垫构成，反应垫上划有检测线T线和质控线C线，使用双抗体夹心法，当样本中待检测的人绒毛膜促性腺激素滴入在样品垫上，在吸水垫的毛细作用下进行移动，然后与金标垫上的金标抗体结合，继续移动到反应垫上与质控线和检测线上的单抗二结合后聚集显色，即代表阳性反应。但是目前胶体金免疫层析技术灵敏度不高，导致只能进行一些疾病的初筛，可信度不高，准确诊断还需要借助其他技术，不利于临床诊断。

发明内容

基于此，有必要提供一种能够提高体外诊断灵敏度的检测试剂及其制备方法和应用。

一种检测试剂，所述检测试剂包括中空金纳米颗粒和负载于所述中空金纳米颗粒表面的功能分子，所述中空金纳米颗粒为中空多孔结构，且所述中空金纳米颗粒的粒径为50-120nm，吸收波长为500nm-700nm，所述功能分子为抗体、抗原、核酸或标志蛋白。

上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：

获取所述中空金纳米颗粒的分散液；

将功能分子负载至所述中空金纳米颗粒的表面，制得所述检测试剂。

一种试纸条，包含有上述检测试剂。

一种试剂盒，包括上述检测试剂，或上述试纸条。

一种检测药物有效性的方法，包括采用上述试剂盒检测待测药物的步骤。

上述检测试剂，或上述试纸条在人兽疾病中间结果鉴定、食品安全检测和兽药残留检测中的应用。

本发明具有以下有益效果：

上述检测试剂通过中空金纳米颗粒负载功能分子，相比于传统的胶体金纳米颗粒，检测下限明显降低。同时本发明的中空金纳米颗粒，相比于常用的胶体金，粒径更大，不易团聚，且为多孔结构，比表面积更大，与功能分子的亲和力更大，故能显著提高功能分子荷载量，进而能够达到提高检测的灵敏性的目的。且中空金纳米颗粒具有优异的对酸碱盐的稳定性，可以提高检测试剂的稳定性，所使用的中空金纳米颗粒外观与胶体金的红棕色不同，呈墨绿色，聚集后可以用肉眼有效的分辨出是否显阳性反应，并且较易分辨出深浅，可以用在传统的免疫层析试纸条中来进行简单的定量。