[发明专利]一种抑制p53蛋白泛素化的调节因子及其应用

说明书

本发明涉及肿瘤靶向治疗领域，具体涉及一种抑制p53蛋白泛素化的调节因子及其应用。所述调节因子为下调RNF187基因或抑制RNF187蛋白表达的物质。本发明由此提供了一种通过RNF187蛋白抑制剂抑制p53蛋白泛素化，从而促进p53信号转导，诱导细胞周期阻滞和凋亡，治疗癌症，尤其是管腔型乳腺癌的治疗用途。

技术领域

本发明涉及肿瘤靶向治疗领域，具体涉及一种抑制p53蛋白泛素化的调节因子及其应用。

背景技术

乳腺癌是世界上最常见的女性癌症，而化疗是乳腺癌患者的主要选择之一，尤其是难治性病例。P53信号是在40多年前被发现的，它总是被激活，并随后导致细胞周期停滞和被基因毒性药物如顺铂诱导的细胞凋亡。临床上，p53状态是预测化疗疗效的重要标志。P53的激活可作为治疗靶点。

P53蛋白由393个氨基酸组成，包括反式激活结构域、DNA结合域、核定位结构域和核输出结构域。当P53蛋白被DNA损伤或氧化应激激活时，P53 的半衰期会增加，导致P53靶基因如P21、P53INP1和Fas的表达增强。随后，它通过线粒体途径引起细胞周期停滞或凋亡。在乳腺癌中，大约30％的乳腺肿瘤中p53发生了突变。有趣的是，与ERα阳性亚型相比，ERα阴性亚型中p53 突变更频繁(≈50％：≈15％)。在ER阳性的乳腺癌中，P53大部分是野生型，可以功能调节ERα基因的表达。

P53蛋白受到精确控制，半衰期约为20分钟。几种泛素连接酶被证明可以直接调节p53蛋白的稳定性，包括MDM2、COP1和CHIP。最著名的是MDM2。一旦p53被激活，它就会诱导MDM2的表达，MDM2随后与p53相互作用，促进p53的多泛素化和降解。MDM2-p53环路有效地保持内稳态，并对某些刺激做出适当的反应。此外，还发现不少E3连接酶可以修饰MDM2-p53复合体，间接调节p53的稳定性，如SMURF1和RBCK1。之前有研究表明，RNF31和 Sharpin蛋白通过调节MDM2的稳定性来促进p53的降解。

然而，尽管已经做了很多努力，但到目前为止，针对p53信号在乳腺肿瘤中的靶向仍然不够成熟。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抑制p53蛋白泛素化的调节因子及其应用，为进一步研究乳腺癌中p53信号的特征，确定新的治疗策略。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明的第一个方面，提供一种抑制p53蛋白泛素化的调节因子，所述调节因子为下调RNF187基因或抑制RNF187蛋白表达的物质。

进一步的，所述物质包括干扰RNF187基因的shRNA、含有所述shRNA 的干扰载体或含有所述干扰载体的慢病毒。

进一步的，所述干扰RNF187基因的shRNA含有如SEQ ID NO.23所示的脱氧核糖核苷酸序列。

进一步的，所述慢病毒是由如下步骤构建得到的：将shRNF187序列克隆到pLKO.1载体中，与pMD2.G和pPAX2包膜质粒共转染HEK293细胞，培养 48小时后获得。

本发明的第二个方面，提供所述的一种抑制p53蛋白泛素化的调节因子在制备治疗癌症的药物中的应用。

进一步的，所述癌症选自乳腺癌。

更进一步的，所述乳腺癌选自管腔型乳腺癌。

更进一步的，所述药物为抗管腔型乳腺癌细胞增殖的药物。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明发现RNF187直接促进乳腺癌中p53的泛素化和蛋白酶体依赖的降解，通过抑制RNF187，从而促进p53信号转导，诱导细胞周期阻滞和凋亡，可以为p53野生型乳腺癌患者提供新的治疗靶点。

附图说明