[发明专利]转基因烟草的LAMP检测引物体系、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种转基因烟草的LAMP检测引物体系，其特征在于，所述引物体系根据15种基因设计，15种所述基因包括18S rRNA、Nr、CaMV35S、FMV35S、NPT II、NOS、Btc、CpTI、EPSPS、CMV-cp、 PVY-cp、TMV-cp、CMV-sat、PVY-Nib、TMV-54kD；

所述引物体系包括核苷酸序列为序列1~序列60的引物；其中，

序列1为18S rRNA的F3引物、序列2为18S rRNA的B3引物、序列3为18S rRNA的FIP引物、序列4为18S rRNA的BIP引物；

序列5为Nr的F3引物、序列6为Nr的B3引物、序列7为Nr的FIP引物、序列8为Nr的BIP引物；

序列9为CaMV35S的F3引物、序列10为CaMV35S的B3引物、序列11为CaMV35S的FIP引物、序列12为CaMV35S的BIP引物；

序列13为FMV35S的F3引物、序列14为FMV35S的B3引物、序列15为FMV35S的FIP引物、序列16为FMV35S的BIP引物；

序列17为NPT II的F3引物、序列18为NPT II的B3引物、序列19为NPT II的FIP引物、序列20为NPT II的BIP引物；

序列21为NOS的F3引物、序列22为NOS的B3引物、序列23为NOS的FIP引物、序列24为NOS的BIP引物；

序列25为Btc的F3引物、序列26为Btc的B3引物、序列27为Btc的FIP引物、序列28为Btc的BIP引物；

序列29为CpTI的F3引物、序列30为CpTI的B3引物、序列31为CpTI的FIP引物、序列32为CpTI的BIP引物；

序列33为EPSPS的F3引物、序列34为EPSPS的B3引物、序列35为EPSPS的FIP引物、序列36为EPSPS的BIP引物；

序列37为CMV-cp的F3引物、序列38为CMV-cp的B3引物、序列39为CMV-cp的FIP引物、序列40为CMV-cp的BIP引物；

序列41为PVY-cp的F3引物、序列42为PVY-cp的B3引物、序列43为PVY-cp的FIP引物、序列44为PVY-cp的BIP引物；

序列45为TMV-cp的F3引物、序列46为TMV-cp的B3引物、序列47为TMV-cp的FIP引物、序列48为TMV-cp的BIP引物；

序列49为CMV-sat的F3引物、序列50为CMV-sat的B3引物、序列51为CMV-sat的FIP引物、序列52为CMV-sat的BIP引物；

序列53为PVY-Nib的F3引物、序列54为PVY-Nib的B3引物、序列55为PVY-Nib的FIP引物、序列56为PVY-Nib的BIP引物；

序列57为TMV-54kD的F3引物、序列58为TMV-54kD的B3引物、序列59为TMV-54kD的FIP引物、序列60为TMV-54kD的BIP引物。

2.一种转基因烟草的LAMP检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的引物体系；

所述引物体系包括18S rRNA引物组、Nr引物组、CaMV35S引物组、FMV35S引物组、NPT II引物组、NOS引物组、Btc引物组、CpTI引物组、EPSPS引物组、CMV-cp引物组、PVY-cp引物组、TMV-cp引物组、CMV-sat引物组、PVY-Nib引物组、TMV-54kD引物组；

每组引物组包括对应基因的F3引物、B3引物、FIP引物和BIP引物；每组所述引物组中各引物的浓度为：F3引物2 μmol/L、B3引物2 μmol/L、FIP引物16 μmol/L、BIP引物16 μmol/L。

3.如权利要求2所述的LAMP检测试剂盒，其特征在于，还包括：

LAMP试剂：适用于所述引物体系；

阳性对照，包括分别以每组所述引物组的F3引物和B3引物为扩增引物扩增的转基因烟草源性DNA，每个扩增的所述转基因烟草源性DNA的浓度为10⁵ copies/μL；

阴性对照，非靶基因源性DNA；

空白对照，三蒸水。