[发明专利]一种鸟苷提纯方法

说明书

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种鸟苷提纯方法，步骤为：A、将鸟苷发酵液调节pH值为9.5～11.5，加热后利用陶瓷膜过滤系统分离发酵液得含鸟苷的滤液，所述加热温度为80～100℃；B、将步骤A的滤液流经大孔活性炭填充柱，吸附分离滤液中的大分子蛋白和杂质，得到澄清的收集液；C、将步骤B的收集液，利用热泵蒸发器浓缩得浓缩液；D、将步骤C的浓缩液，用盐酸调节pH6.5～7.5，降温结晶，析出鸟苷晶体，15～25℃分离得到粗品；粗品加入溶解罐，加热溶解，加入聚硅铁絮凝，脱色，过滤，滤液降温结晶，分离得到精品，烘干得到鸟苷成品。本发明提纯工艺成本低，鸟苷质量、收率提高。

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种鸟苷提纯方法。

背景技术

鸟苷(Guanosine)，也称为鸟嘌呤核苷，又名9-β-D-呋喃核糖基鸟嘌呤，难溶于冷水，易溶于温水，18℃下1320mL水中溶解1g；然而在沸水浴中，33mL水中就能溶解1g。还可溶于酸碱，如稀盐酸、热乙酸等；不溶于有机溶剂，如醇、醚、氯仿和苯等。鸟苷的用途十分广泛，是食品和医药产品的重要中间体，由于其磷酸化的5’-鸟苷酸二钠具有呈味特性，加之与谷氨酸钠有协同效应，因此可提高味精鲜味数倍至数十倍。同时它还是利巴韦林、阿昔洛韦、无环鸟苷、三氮唑核苷、三磷酸鸟苷钠等核苷类抗病毒药物的重要原料。目前，鸟苷需求以每年10～20％的速度增加。现有的从发酵液中提纯分离鸟苷的方法为发酵液过膜除去菌体，得到的滤清液再通过超滤膜除蛋白、再进一步精制获得鸟苷。然而，现有的鸟苷提取方法主要存在以下问题：首先，超滤膜脱除蛋白投入成本高、纯化不完全、清洗难度大和运行耗电量大，膜组件在实际使用的过程中由于温度高和碱性大且难以再生完全，损坏频繁，严重影响正常生产的进行；其次，膜滤液结晶的过程中，由于鸟苷浓度低，结晶液体积大，需要耗用大量的冷媒降温结晶，且结晶不完全，母液量大，难以回收，鸟苷损失较多；再次，精制用普通的絮凝剂和活性炭脱色难以除去残余的杂蛋白，导致精制后的鸟苷含量难以提高，鸟苷品质需要进一步提高，才能达到市场使用要求。

发明内容

针对上述技术缺陷，本发明解决现有提取工艺中鸟苷收率较低的问题，同时保证所提取的鸟苷品质。本发明提供一种鸟苷提纯方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：一种鸟苷提纯方法，包括以下步骤：A、将鸟苷发酵液调节pH值为9.5～11.5，加热后利用陶瓷膜过滤系统分离发酵液，浓缩液为菌体溶液，干燥成饲料蛋白，透析液为含鸟苷的滤液，所述加热温度为80～100℃；B、将步骤A的滤液流经大孔活性炭填充柱，吸附分离滤液中的大分子蛋白和杂质，得到澄清的收集液；C、将步骤B的收集液，利用热泵蒸发器浓缩，得到鸟苷浓度为15～35％，温度为75～85℃的浓缩液；D、将步骤C的浓缩液，用盐酸调节pH6.5～7.5，降温结晶，析出鸟苷晶体，15～25℃分离得到粗品；E、在溶解罐中加入水，将步骤D的粗品加入溶解罐，加热溶解，再加入聚硅铁絮凝，脱色，过滤，滤液降温结晶，分离得到精品，烘干得到鸟苷成品。

进一步：在上述鸟苷提纯方法中，所述步骤B中大孔活性炭填充柱的活性炭孔径在2～100nm，颗粒为10～40目，吸附杂质后，用水反冲除去固体杂质，加碱再生，洗水，脱除大分子蛋白和杂质；所述步骤E中的溶解控制鸟苷浓度为3～10％，加热温度为80～95℃。所述步骤E中的絮凝过程为加入溶液总体积0.1～1％的絮凝剂聚硅铁，保温絮凝15～30min。传统使用的聚合硫酸铝、聚合氯化铝含有铝离子，对人体有害；聚丙烯酰胺中残留及使用过程中分解的丙烯酰胺具有毒性；聚合氯化铝挥发盐酸，危害健康；聚合硫酸铝酸性，需要加入较多碱去中和。聚硅铁适用范围广，PH值5～13范围内可使用，中性条件使用效果好；不含铝离子，对人体无毒无害；絮凝速度快、矾花密实、絮体尺寸大，沉降速度快、沉降性能优异，大幅降低了过滤难度和过滤时间；絮凝效率高，比聚铝、聚铁类产品用量更少。