[发明专利]基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测Pb2+

权利要求书

1.一种基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测pb²⁺的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)织物基微流控芯片的制作：该织物基芯片由亲水织物、疏水织物、棉线、支撑板和三电极系统组成，支撑板上一端固定亲水织物，一端固定疏水织物，二者通过棉线连接，疏水织物端放置滤纸，滤纸上镀金膜，作为工作电极，上层叠加塑料盖板，其上设置铜线作为导线，与连接固定在塑料盖板上的AgCl参比电极和对电极，构建三电极体系，通过连接便携式电化学检测站，实现重金属的检测；

(2)镀金纸片的制作：将滤纸置于真空离子溅射仪中镀金膜；

(3)CeMOF的制备；

(4)织物基微流控芯片检测pb²⁺：将CeMOF浸入EDC/NHS溶液中，活化CeMOF的羧基，使CeMOF与GR-5DNAzymeApt2组装，得到Apt2-CeMOF信号探针；将Apt1负载在镀金纸片上，得到Au-Apt1；将Apt2-CeMOF信号探针与Au-Apt1通过碱基互补配对原则进行连接；用移液枪在镀金纸片上加入不同浓度的Pb²⁺，利用织物基底结合镀金工作电极、AgCl参比电极和对电极三电极体系，通过连接便携式电化学检测站进行电化学测试。

2.根据权利要求1所述的基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测Pb²⁺的方法，其特征在于：所述CeMOF的制备方法包括：吡咯与对甲酰基苯甲酸甲酯混合后加入丙酸使有机物完全溶解，将溶液加热回流冷却至室温，加入无水乙醇，抽滤得到粗产物，分别用乙醇和乙酸乙酯洗涤，最后将粗产物干燥提纯得到紫色卟啉前驱体，将卟啉前驱体和CeCl₃·7H₂O溶于N，N二甲基甲酰胺中，加入水，将生成的沉淀物过滤，水洗，再将所得固体用二氯甲烷溶解，然后用HCl和水萃取，有机层旋蒸得到紫红色粉末，紫红色粉末溶解在四氢呋喃和甲醇混合液中，然后加入KOH水溶液，加热后冷却至室温，然后酸化处理直至没有固体产生为止，抽滤所得固体，蒸馏水冲洗后干燥得到四羧基卟啉配体，将ZrCl₄、四羧基卟啉配体、苯甲酸超声溶解于N，N二甲基甲酰胺中，反应，冷却至室温，再用N，N二甲基甲酰胺、丙酮洗涤后真空干燥得到CeMOF。

3.根据权利要求1所述的基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测pb²⁺的方法，其特征在于：

Apt1的序列：

5’-tcctcgtatgttttgtagtgatccaacccaaaacatacgaggatcactaggttggatcgtatgttttgggttgggcggg-SH-3’。

4.根据权利要求1所述的基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测pb²⁺的方法，其特征在于：

Apt2的序列：

5’-NH₂-atcactaggttggatcactaggttgggttttgtatgctcctagtgatccaacctagcatacaaattgggt-3’。

5.根据权利要求1所述的基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测Pb²⁺的方法，其特征在于：CeMOF自身带有一个羧基，Apt2链的末端标记有-NH₂，二者被1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺/N-羟基-琥珀酰亚胺(EDC/NHS)修饰，作为传感器的第二信号探针。

6.根据权利要求1或3所述的基于CeMOF标记的DNA适配体构建的织物基微流控芯片检测Pb²⁺的方法，其特征在于：Apt1负载在镀金纸片上的方法为：带有-SH的Apt1链在3’末端通过Au-S键固定在镀金纸片上。